miR-186通过下调垂体瘤转化基因1的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖侵袭.PDFVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 ·864 · Chin J Cancer Biother, Aug. 2017, Vol. 24, No. 8 DOI：：10.3872/j.issn.1007-385x.2017.08.008 ∙基础研究∙ miR-186 通过下调垂体瘤转化基因1 的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖侵袭 并诱导其凋亡 1 1 2 1 1 1 1 1 李乾 ，魏志辉 ，肖前仁 ，陈佳骏 ，周新 ，王滕羽 ，张中卒 ，张铭华 （1. 重庆医科大学附属永川医院骨科，重 庆 402160 ；2. 南昌大学附属第一医院 骨科，江西南昌 330000） [摘 要] 目的:探讨miR- 186对骨肉瘤细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响，并探讨其可能机制。方法:实时荧光定量PCR 检测 骨肉瘤细胞HOS 、U2-OS 、Saos-2 及成骨细胞NHOst 中miR- 186表达，并运用人工合成的miR- 186模拟片段及对照scramble mimic 转染至人骨肉瘤HOS 及U2-OS 细胞内，运用实时荧光定量PCR 检测转染后细胞中miR- 186 的表达水平；分别运用CCK-8 法、流 式细胞检测技术及Transwall 体外侵袭实验检测过表达miR- 186对HOS 及U2-OS 细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响；运用West- ern blotting 及实时荧光定量PCR 检测miR- 186过表达对细胞中垂体瘤转化基因1(pituitary tumor transforming gene 1, PTTG 1) 的蛋 白及mRNA 表达水平的影响。结果:骨肉瘤细胞中miR- 186呈现低表达；转染人工合成的miR- 186片段可上调HOS 及U2-OS 细 胞中miR- 186 的表达；miR- 186 过表达组细胞的增殖能力较scramble 组明显下降(P0.01) ，转染组HOS[( 16.9±2.1)% vs (10.4± 1.6)% ，P0.05]及U2-OS[(22.6±2.9)% vs (14.1±2.2)% ，P0.05]细胞的凋亡比例明显高于scramble 组，转染组HOS 及U2-OS 细胞的 穿膜数明显低于scramble 组(P0.01) ；转染组细胞中PTTG 1 的蛋白及mRNA 表达水平均明显下降(P0.01) ，而scramble 组无明显 变化(P ＞0.05) ；结论:miR- 186 能够抑制骨肉瘤细胞的增殖及侵袭并促进细胞凋亡，其作用机制可能与抑制PTTG 1表达相关。 [关键词] miR- 186；骨肉瘤；垂体瘤转化基因1 [中图分类号] R730.59 ；R736.4 [文献标识码] A [文章编号] 1007-385X （2017 ）08-0864-06 miR- 186 suppresses the proliferation and invasion and promotes apoptosis of os- teosarcoma cells partially through targeting PTTG1 1 1 2 1 1 1 1 LI Qian , WEI Zhihui , XIAO Qianren , CHEN Jiajun , ZHOU Xin , WANG Tengyu , ZHANG Zhongzu , ZHANG Minghua1 (1. Department of Orthopedics, Yongchuan Hospital Affiliated to Chongqing Medical University, Chongqing 402160, China; 2. Department of Orthopedics, First