基础化学六-湖北医药学院.PPTVIP

基础化学实验八—— 邻二氮菲分光光度法测Fe 湖北医药学院 医用化学教研室 实验目的 理解分光光度法的原理 掌握邻二氮菲分光光度法测Fe的原理 熟练使用721型（722S型）分光光度计 实验原理 邻二氮菲是目前应用于测定微量Fe的较好试剂，在pH=2~9的溶液中，与试剂Fe2+生成稳定的红色配合物，lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε=1.1×104，最大吸收波长λmax=508nm。在上述pH范围内，配合物十分稳定，可以很好地服从Lamber-Beer定律。本方法的选择性也很高，Fe必须是亚铁状态，因此在显色前要加入还原剂。 Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+4H2O 实验步骤 在6只50mL容量瓶中，用移液管分别加入0.00mL（试剂溶液），0.40ml（1），0.80ml（2），1.20ml（3），1.60ml（4），2.00ml（5）标准铁溶液（含Fe2000μmol/L)，分别加入1.5mol/L盐酸羟胺溶液1mL，8mmol/L邻二氮菲溶液2mL和1mol/LNaAc5mL，加水稀释至刻度，摇匀。 用1cm比色皿，以（5）号溶液为样品，试剂溶液为参比在480-540nm处，每5nm测一次吸光度，其中500-510nm每2nm测一次，测定各波长的吸光度，以吸光度A为纵坐标，波长为横坐标，作吸收曲线λ—A。从吸收曲线上确定最大