酶的功能及作用培训.ppt

2. Km值的大小可以近似反应酶与底物亲和力的大小。Km越小，酶与底物的亲和力越大。 3.可用于判断反应级数：当[S]0.01Km时，反应为一级反应；当[S]100Km时，ν=Vmax，反应为零级反应；当0.01Km[S]100Km时，为混合级反应。 4. Km是酶的特征性常数：只与酶的性质有关，与酶的浓度无关 。 5. Km可用来判断酶的最适底物：如酶能催化几种不同的底物，对每种底物都有一个特定的Km值，其中Km值最小的称该酶的最适底物。 双倒数作图法 LINEWEAVER- BURK ： （四）Km和Vmax的测定： （五）双底物双产物反应 A+B P+Q 双底物双产物的反应按动力学机制可分为两大类 : 双底物 双产物的反应 序列反应 （sequential reactions） 乒乓反应 （ping pong reactions） 有序序列反应 （orderd reactions） 随机序列反应 （random reactions） 1．有序序列反应（ordered reactions 写作 ordered Bi Bi） 2．随机序列反应（random reactions， 写作Random Bi Bi） 3．乒乓反应（ping pong reactions，写作uni ping pong or Ping Pong Bi Bi） 五、抑制剂对反应速度的影响 凡是能降低酶促反应速度，但不引起酶分子变性失活的物质统称为酶的抑制剂(inhibitor)。 按照抑制剂的抑制作用，可将其分为不可逆抑制作用(irreversible inhibition) 和可逆抑制作用(reversible inhibition)两大类。 （一）不可逆抑制作用： 抑制剂与酶分子的某些基团共价结合引起酶活性的抑制，且不能采用透析等简单方法使酶活性恢复的抑制作用就是不可逆抑制作用。 * 举例 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) 　 　 有机磷化合物对羟基酶的抑制 路易士气 失活的酶 巯基酶 失活的酶 酸 BAL 巯基酶 BAL与砷剂结合物 （二）可逆性抑制作用： 抑制剂以非共价键与酶分子可逆性结合造成酶活性的抑制，且可采用透析等简单方法去除抑制剂而使酶活性完全恢复的抑制作用就是可逆抑制作用。 可逆抑制作用包括竞争性、反竞争性、和非竞争性抑制几种类型。 1.竞争性抑制（competitive inhibi-tion)： （1）概念： 抑制剂与底物竞争与酶的某一部位结合，从而干扰了酶与底物的结合，使酶的催化活性降低，称为竞争性抑制作用。 竞争性抑制 竞争性抑制的速度方程与图形特征 竞争性抑制的双倒数图形特征 （2）竞争性抑制的特点： ①竞争性抑制剂往往是酶的底物类似物或反应产物； ②抑制剂同酶的结合部位与底物同酶的结合部位相同或不同； ③抑制剂浓度越大，则抑制作用越大；但增加底物浓度可使抑制程度减小； ④动力学参数：Km值增大，Vm值不变。 * 举例 1.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 2. 磺胺药对细菌FH2合成酶的抑制 2．反竞争性抑制： （1）概念 抑制剂不能与游离酶结合，但可与ES复合物结合并阻止产物生成，使酶的催化活性降低，此抑制作用称酶的反竞争性抑制。 　　抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物结合，使ES的量下降。 反竞争性抑制 ? 反竞争性抑制的双倒数图形特征 （2）反竞争性抑制的特点： ①反竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似； ②抑制剂与底物可同时与酶的不同部位结合； ③必须有底物存在，抑制剂才能对酶产生抑制作用；抑制程度随底物浓度的增加而增加； ④动力学参数：Km减小，Vm降低。 3．非竞争性抑制： （1）概念 抑制剂既可以与游离酶结合，也可以与ES复合物结合，使酶的催化活性降低，称为非竞争性抑制。 　　抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系。　 非竞争性抑制 非竞争性抑制的双倒数图形特征 （2）非竞