植物过氧化物酶(POD)检测试剂盒(愈创木酚微板法).pdfVIP

北京雷根生物技术有限公司 植物过氧化物酶(POD)检测试剂盒(愈创木酚微板法) 简介 ： 过氧化物酶(peroxisome ，POD)是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶 ，主要 存在于细胞的过氧化物酶体中 ，以铁卟啉为辅基 ，可催化过氧化氢 ，氧化酚类和胺类化合 物 ，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。该酶属于细胞木质素合成途径中间 的关键酶 ，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理 ，为减少水 果石细胞含量提高其品质提供依据。 Leagene 植物过氧化物酶(POD)检测试剂盒(愈创木酚微板法)检测原理是以愈创木酚 作为底物 ，在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法 ，于酶标仪 470nm处检测吸光度 ，以吸光度变化所需酶量进行计算。该试剂盒主要用于植物组织的裂 解液或匀浆液、血清等样品中内源性的过氧化物酶活性 ，尤其适用于检测水果中过氧化物 酶活性。该试剂盒仅用于科研领域 ，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成 ： 编号 TE0423 Storage 名称 100T 试剂(A) POD Lysis buffer 500ml 4℃ 试剂(B) PODAssay buffer 10ml 4℃ 避光 试剂(C) POD氧化剂 1ml RT 使用说明书 1份 自备材料 ： 1、蒸馏水 2、研钵或匀浆器 3、离心管或试管 4、低温离心机 5、水浴锅或恒温箱 6、酶标板 7、酶标仪 操作步骤(仅供参考) ： 1、准备样品 ： ①植物样品 ：取植物组织或水果中层果肉加入预冷的 POD Lysis buffer研磨或匀浆 ，离心 ， 北京雷根生物技术有限公司 留取上清液 ，冻存 ，用于过氧化物酶的检测。 ②血浆、血清和尿液样品 ：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定 ， 冻存 ，用于过氧化物酶的检测。 ③细胞或组织样品 ：取恰当细胞或组织裂解液 ，如有必要用 POD Lysis buffer进行适当匀 浆 ，离心 ，取上清液 ，-冻存 ，用于过氧化物酶的检测。 ④高活性样品 ：如果样品中含有较高活性的过氧化物酶 ，可以使用 POD Lysis buffer进行 恰当的稀释。 2、配制 PODAssay buffer工作液 ：取适量 POD氧化剂和 PODAssay buffer ，POD氧 化剂 ：PODAssay buffer按一定混合 ，即为 PODAssay buffer工作液 ，即配即用 ， 不宜久置。 3、加样 ：按照下表设置对照孔孔、测定孔 ，注意 ：对照孔、测定孔中为同一待测样品 ，但 对照孔中是提前加热煮沸的样品。溶液应按照顺序依次加入 ，并注意避免产生气泡。如 果样品中的 POD活性过高 ，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测 最好能设置平行孔 ，求平均值。 加入物(μl) 对照孔 测定孔 待测样品 5 5 POD Lysis buffer 145 145 PODAssay buffer工作液 100 100 4、POD检测 ：立即以酶标仪 ，以对照孔为对照 ，测定测定孔的吸光度(A 测定 0)。准确孵育