人核转录因子肽（NF-κBp65）操作步骤6.docVIP

人核转录因子肽(NF-κB p65)操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 2400ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液 1200ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液 600ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液 300ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液 150ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μ