分子排阻色谱法（测定多糖分子量及其分布）--梁翠荣.pptVIP

分子排阻色谱法 测定多糖分子量及其分布 分离原理 凝胶渗透色谱 Gel Permeation Chromatography GPC 也称体积排阻色谱 Size Exclusion Chromatography SEC 让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱，柱中可供分子通行的路径有颗粒间的间隙（较大）和颗粒内的微孔（较小）。当聚合物溶液流经色谱柱时，大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时移动的速度较快（即保留时间短）；小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔，洗脱时移动的速度要慢得多（即保留时间长）。经过一定长度的色谱柱，分子根据相对分子大小被分开，这种现象叫分子筛效应。 测定方法 直接法：在测定淋出液浓度的同时，测定其粘度或光散射，从而求出其分子量。 间接法：用一组分子量不等的、单分散的试样为标准样品，分别测定它们的淋出体积（保留时间），建立保留时间与分子量二者之间的关系，从而求出其分子量。 间接法 右旋糖酐分子量对照品（ 供右旋糖酐分子量测定用 中检所） 右旋糖酐分子量D1 M 2500 ； 右旋糖酐分子量D2 M 4600 ；