miRNA-221和miRNA-222对前列腺癌细胞PC-3的增殖迁移及SIRT1.PDFVIP

·４４６· 检验医学２０１４年５月第２９卷第５期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｍａｙ２０１４，Ｖｏｌ２９．Ｎｏ５． 文章编号：１６７３８６４０（２０１４）０５０４４６０６　　　中图分类号：Ｑ７４　　　文献标志码：Ａ　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３８６４０．２０１４．０５．００５ ｍｉＲＮＡ２２１和ｍｉＲＮＡ２２２对前列腺癌细胞 ＰＣ３的增殖、迁移及 ＳＩＲＴ１表达的调控 杨　晓，　甘　蓉，　杨英梅，　赵苓旭，　薄金双，　官雁鸣，　孟庆贺，　吕建新 （温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室，浙江 温州３２５０３５） 　　摘要：目的　观察前列腺癌ＰＣ３细胞中微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）２２１和ｍｉＲＮＡ２２２对细胞增殖和迁 移的作用，以及对沉默信息调节因子１（ＳＩＲＴ１）表达的影响。方法　设立无处理细胞组（简称ｃｏｎｔｒｏｌ组）、转染空 载质粒ｐＥＸ５组（简称ｐＥＸ５组）、转染ｍｉＲＮＡ２２１反义抑制质粒组（简称ｍｉＲＮＡ２２１抑制组）、转染ｍｉＲＮＡ２２２ 反义抑制质粒组（简称ｍｉＲＮＡ２２２抑制组），应用细胞计数试剂盒（ＣＣＫ８法）检测ｍｉＲＮＡ２２１和ｍｉＲＮＡ２２２对 前列腺癌细胞增殖的影响；采用细胞划痕修复实验检测ｍｉＲＮＡ２２１和ｍｉＲＮＡ２２２对细胞迁移能力的影响；采用 免疫印迹法和荧光定量聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测 ＳＩＲＴ１在蛋白水平和ｍＲＮＡ水平的变化；采用ｍｉＲＮＡａｎｄａ靶 标进行预测分析。结果　在成功抑制了ＰＣ３细胞中ｍｉＲＮＡ２２１或ｍｉＲＮＡ２２２的表达后，连续７ｄ检测细胞活 性，ｍｉＲＮＡ２２１抑制组和ｍｉＲＮＡ２２２抑制组的细胞活性（Ａ 值）较ｐＥＸ５组降低 １．５～２．０倍，自第３天起两 ４５０ｎｍ 组之间即有明显差异（ｔ＝６．７，Ｐ＜０．０１；ｔ＝５．３，Ｐ＜０．０１）；划痕实验显示，ｍｉＲＮＡ２２１抑制组和ｍｉＲＮＡ２２２抑 制组的迁移能力明显低于ｐＥＸ５组。ｍｉＲＮＡ２２１抑制组、ｍｉＲＮＡ２２２抑制组中ＳＩＲＴ１蛋白的相对表达量分别为 （０．２６±０．０２１）、（０．２１±０．００５８），与ｐＥＸ５组（０．１４±０．０１７）比较差异均有统计学意义（ｔ值分别为６．３、６．４，Ｐ 均＜０．０５）；而ＳＩＲＴ１ｍＲＮＡ的表达水平３组之间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ｍｉＲＮＡ２２１和ｍｉＲＮＡ ２２２能促进前列腺癌ＰＣ３细胞的增殖与迁移能力，影响ＳＩＲＴ１蛋白的表达。 关键词：微小ＲＮＡ２２１；微小ＲＮＡ２２２；沉默信息调节因子；前列腺癌 　　 Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｍｉｇｒａｔｉｏｎａｎｄＳＩＲＴ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＰＣ３ｂｙ ｍｉＲＮＡ２２１ａｎｄｍｉＲＮＡ２２２　ＹＡＮＧＸｉａｏ，ＧＡＮＲｏｎｇ，ＹＡＮＧＹｉｎｇｍｅｉ，ＺＨＡＯＬｉｎｇｘｕ，ＢＯＪｉｎｓｈｕａｎｇ，ＧＵＡＮ Ｙａｎｍｉｎｇ，ＭＥＮＧＱｉｎｇｈｅ，ＬＪｉａｎｘｉｎ．　（ＺｈｅｊｉａｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＧｅｎｅｔｉｃｓ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙ ＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＷｅｎｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＺｈｅｊｉａｎｇＷｅｎｚｈｏｕ３２５０３５，Ｃｈｉｎａ） 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｏｌｅｓｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）２２１ａｎｄｍｉＲＮＡ２２２ｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄ ｍｉｇｒａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｃｅｌｌＰＣ３ａｎｄｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎｓｉｌｅｎｔｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｒｅｇｕｌａｔｏｒ１（ＳＩＲＴ１）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅａｒｒａｎｇｅｄａｓｃｅｌｌｓｗｉｔｈｏｕｔｔｒｅａｔｍｅｎｔ（ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ），