实验七1体barr小体制片及观察.pptVIP

遗 传 学 实 验 实验七 退出 * * 人体barr小体的制片及观察 实验七 * * 三色猫（又叫做三玳瑁猫） x连锁的基因失活 * * 1949年，M．L．Barr等人发现，在猫的雌性个体内，神经细胞核膜内缘有一染色很深的小体(后来定名为x小体或Barr氏小体、巴氏小体)，而雄性个体细胞中则没有。 * * * * 以后在人类女性口腔上皮、阴道上皮、皮肤、羊水等细胞中，也发现了类似的结构。 barr小体的数目在正常女性中是X染色体数目减去一。经观察，X小体一般1-1.5微米，呈三角形或卵圆形。 * * * * 2n=46(XX) * * 在人类，男性细胞核中很少或根本没有barr小体，而女性则有1个。 以后研究表明，barr小体就是x染色质异固缩（细胞分裂周期中与大部分染色质不同步的螺旋化现象）的结果。 体育运动会上的性别鉴定主要采用barr小体方法。 * * In 1961, British Geneticist Mary Lyon * * Lyon假说（Lyon hypothesis） 正常雌性哺乳动物的体细胞中，两条X染色体中只有一条在遗传上有活性，另一条在遗传上无活性。 X染色体的失活是随机的。 失活发生在胚胎发育早期，X染色体一经失活，其后代细胞中该染色体均处于失活状态。 * * * * 胎儿性别和性染色体异常的患者 克氏(Klinefelter′s)：47，XXY，有一个巴氏小体. 特纳氏(Turners)：45，XO，无barr小体。 如XXY、XXYY有1个巴氏小体，而XXX、XXXY有2个巴氏小体等。 * * 2n = 47（XXY） * * 人类的特纳氏（Turner syndrome， 44+x）综合症 2n = 45（XO） * * * * 2n=47(XXX) * * 一、实验目的 1．学习和掌握人体barr小体的制片技术； 2．观察barr小体； 3．了解barr小体数目与人类性别畸形的关系； 4．了解异固缩现象。 * * 二、实验材料 人体口腔上皮细胞 毛囊细胞的根部 * * 四、实验器具和药品 实验器具：显微镜、载片、盖片、无菌牙签等。 实验药品： 1、1N或5N盐酸或浓盐酸和95％乙醇 1：1的混合液。 2、改良苯酚品红染色液。 * * 五、实验步骤 （一）口腔粘膜细胞Barr氏小体显示方法 1、取材与固定：实验前用可食用水漱口，然后以无菌牙签刮取口腔颊部粘膜(第一次的刮取物弃去)，将刮取物均匀涂于载玻片上，放在空气中干燥。 2、染色与观察：用改良苯酚品红染液染色10－15分钟，倾斜载玻片，倒掉染液。用吸水纸轻轻擦拭干载玻片上的染液。放于显微镜下观察。 * * 注意 在制作的玻片标本中，选择细胞轮廓清楚、染色清晰，核大，核质呈均匀细网状的细胞100个，统计barr小体的频率(可与男性细胞对照观察)。 制片时，一定刮取细胞膜、核膜完整的,细胞核未解体的口腔粘膜细胞。 * * （二）发根毛囊细胞Barr氏小体显色方法 1、取材：取带有发根的头发，围绕发根部的1圈长2-3mm的白色物体，即是毛囊细胞团，将其放置于载片上。在毛囊细胞处滴加一滴浓盐酸和95％乙醇1：1的混合液。约10min以后，可使毛囊细胞得到充分软化。以清水冲洗2-3遍，将酸解液冲洗干净。拿起上述发根的梢部，将其上毛囊细胞轻轻蹭于另一干净载片上即可达到转移的目的。 * * 2、染色：可滴加1滴染液于待测细胞上，注意染液不可过多，以免细胞流失。约10min后，加盖玻片即可进行观察。 * *