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实验五、血糖含量的测定 一、目的要求 掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法 二、实验原理 血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输形式。 本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反应生成5－羟甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色的薛夫氏碱，通过比色可以定量。 三、试剂和器材 试剂 邻甲苯胺试剂：称取硫脲1.5ｇ溶于750ｍL冰醋酸中, 加邻甲苯胺150ｍL及饱和硼酸40ｍL, 混匀后加冰醋酸至1000ｍL, 置棕色瓶中，冰箱保存。 葡萄糖标准溶液：0.1mg/mL。 材料 动物血清 器材 具塞试管1.5×15cm（×8）；分光光度计。 四、操作方法 1.制作标准曲线 取6支试管编号后，按下表顺序加入试剂： 加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置30min，用1cm比色杯，试剂空白为参比，测定630nm 处吸光值，绘制标准曲线。 2、样品测定 取3支试管编号后，分别加入试剂，与标准曲线同时作比色测定： ?加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置30min，用1cm比色杯，试剂空白为参比，测定630nm 处吸光值，从标准曲线中可查出样品中血糖含量。 五、注意事项 该法一般在浓酸高温条件下发生反应, 在做血糖测定时须多加注意。 六、思考题 简述测定血糖在临床上的意义。 * * 5.0 0.0 1.0 5 A630 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 邻甲苯胺试剂(mL) 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸馏水(mL) 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 标准葡萄糖液(mL) 4 3 2 1 0 管号 A630 5.0 5.0 5.0 邻甲苯胺试剂(mL) 0.00 0.00 0.10 蒸馏水(mL) 0.10 0.10 0.00 稀释的未知血清样品(mL) 样品② 样品① 对照 管号