实验四姊妹色单体分染技术学时综合性设计性.pptVIP

人体淋巴细胞姐妹染色单体互换 * 实验四、姊妹染色单体分染技术（３学时）（综合性、设计性实验） 一、实验目的和要求 了解姊妹染色单体差别染色技术的原理和制作ＳＣＥ标本的方法，并通过ＳＣＥ标本的观察，掌握ＳＣＥ计数方法。 二、实验原理 在ＤＮＡ复制过程中，核苷的类似物５－溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）能代替胸腺嘧啶进入到新合成的ＤＮＡ链中，植物根尖在含有适当Brdu的培养液中生长二个分裂周期后，中期染色体的两条染色单体在化学组成上有了差别，一条染色单体的两条ＤＮＡ链均为新合成的，因此Ｔ位完全由Brdu代替，另一条染色单体的一条ＤＮＡ链是新合成的，所以只有一条ＤＮＡ中含有Brdu，这样的细胞经染色后，一条为深染，一条为淡染，所以称之为姊妹染色单体的差别染色。本实验运用这一原理，利用大蒜根尖作为材料，经过适当处理制片，可观察到姊妹染色单体分染现象。 姊妹染色单体区分染色法中使用的诱变剂是什么？原理是什么？5-Brdu。旺盛分裂的组织细胞，由于细胞分裂旺盛，DNA的合成量大，会出现核苷酸短缺的情况，5-Brdu与碱基中的尿嘧啶结构相似，会掺入到DNA合成链中与腺嘌呤配对，而在后续的合成中，5-Brdu会和5-Brdu结合形成紧密结合。当用HCl解离DNA时，会有醛基暴露出来，而使用改良的席夫试剂中含有的无色SO2会和醛基结合形成紫色基团。但是掺入了5