生物表面活性剂Surfactin生产菌株的定向改造策略-微生物学报.PDF

微生物学报 A cta Microbiologica Sinica 2018, 58(10): 1711-1721 /actamicrocn DOI: 10.13343/ki.wsxb Review 综 述 生物表面活性剂 Surfactin 生产菌株的定向改造策略 胡仿香，李霜* 南京工业大学生物与制药工程学院，江苏 南京 210009 摘要：表面活性素(Surfactin)是芽胞杆菌属(Bacillus sp.)代谢产生的脂肽类生物表面活性剂，是由非核 糖体肽合成酶(NRPS)催化而得的一种次级代谢产物。由于 surfactin 具有稳定性好、可被降解、表面活 性好等理化性质以及抑菌、抗肿瘤等生物活性，在医药、农业、食品、化妆品、石油开采等方面都具 有很大的应用潜力。但是，天然菌株产率低、生产成本高等特点限制了surfactin 的规模化应用。本文 对surfactin 的合成机理进行了简要阐述，并针对目前提升surfactin 产量和改变结构组分的4 种定向改 造策略(启动子工程、强化外排分泌、改造 NRPS 结构域和脂肪酸链合成酶系)进行了综述，最后对 surfactin 的研究方向进行了展望。 关键词：Surfactin ，脂肽，非核糖体肽合成酶(NRPS) ，启动子工程，定向改造 脂肽(lipopeptides)是由微生物产生的一类生 0.005%浓度下，能将纯水的表面张力从72 mN/m 物表面活性剂(biosurfactant) ，由亲水的肽链和亲 降到 27.9 mN/m 。相比于化学类表面活性剂， 油的脂肪烃链两部分组成，按其结构特征大致可 surfactin 具有低毒、易生物降解、较高的环境适应 分为环状脂肽(cyclic lipopeptides ，CLPs)与线性 性和较高的表面活性等优点，在农业、医药和日 脂肽两类。表面活性素(surfactins)是芽胞杆菌合 化等领域具有非常良好的应用前景[3] 。在微生物采 成的环脂肽类主要家族之一，其余还包括伊枯草 油和污染物治理等环境领域，生物表面活性剂 菌素(iturins)家族、丰原素(fengycins ，芬介素)家 surfactin 有助于石油烃的乳化增溶，可以作为微生 族等[1] 。 物降解原油的增效剂[4] 。然而，surfactin 的发酵生 Surfactin 由日本学者Arima 在枯草杆菌Bacillus 产存在产量低和成本高等问题，阻碍了其产业化 subtilis IFO3039 发酵液中首次发现，是迄今已报 及大规模应用。目前，除了采用传统的诱变育种 道的表面活性最好的生物表面活性剂之一[2] ；在 及发酵工艺优化等手段外，一些利用基因工程定 基金项目：国家自然科学基金 ，江苏省“六大人才高峰”资助项目 *通信作者。E-mail ：lishuang@ 收稿日期：2017-12-13 ；修回日期：2018-01-23 ；网络出版日期：2018-03-21 1712 Fangxiang Hu et al. | Acta Microbiologica Sinica , 2018, 58(10) 向改造 surfactin 生产菌株的策略也应运而生。本 成。用于合成 surfactin 的NRPS 是一个多酶复合 文对 surfactin 的结构特点、合成机理及应用特性 物，包括 Srf-AA-AB-AC-AD 四个亚基，由 srfA 进行简述，并对目前面向 surfactin 的结构改造和 基因簇上的4 个基因(srfAA 、srfAB 、srfAC 和srfAD) 产量提高的策略进行了总结，以期为推动surfactin 编码[6–7] 。亚基SrfAA 和SrfAB 各包含3 个模块， 的产业化提供参考。 SrfAC 亚基包含 1 个模块；每一个模块负责 1 个 氨基酸的整合，氨基酸的排列顺序就由模块的顺 1 Surfactin 的结构特点