环渤海湾苹果产区再植障碍园与丰产园土壤细菌遗传多样性分析-微生物学专业论文.docxVIP

山东农业大学硕士学位论文 环渤海湾苹果产区再植障碍园与丰产园土壤细菌遗传多样性分析  PAGE 3 2 中文摘要 本研究采用了 T-RFLP 技术和 DGGE 技术等分子生物学方法调查并比较了青县、昌 邑、瓦房店三个再植障碍较严重的采样点土壤中的细菌多样性及群落结构，并结合相关 环境数据，通过 PCA、CCA 等统计学方法评价了土壤中细菌群落变化与营养元素变化 的相关性；同时对来自于环渤海湾苹果产区的九个采样点的土壤样品中的可培养细菌进 行分离，获得了一株对苹果常见土传病害具有良好抗性的拮抗菌，以及能够有效降解苹 果主要自毒物质——根皮苷的降解菌。 多样性分析的结果表明，环渤海湾苹果产区的再植障碍园样品的群落结构特点与丰 产园样品有明显差异；丰产园土壤中细菌群落的多样性以及均匀度指数大于再植障碍园 样品，优势度指数则相反。CCA 分析的结果表明土壤中 Cu 含量的变化与环渤海湾苹果 产区再植障碍园与丰产园土壤中细菌群落结构的差异有一定的相关性。基于 T-RFLP 的 定性分析的结果表明环渤海湾苹果产区果园土壤中占优势的细菌群落可能由 Firmicutes 、 γ-Proteobacteria 、 Actinobacteria 、 α-proteobacteria 、 β-proteobacteria 、 Bacteroidetes 和 Tenericutes 构成；再植障碍园土壤中 γ-Proteobacteria 和 Actinobacteria 所占比例大于丰产园；Tenericutes 仅存在于丰产园样品中，仅存在于再植障碍园样品中 的 T-RF 489bp 属于 γ-Proteobacteria。DGGE 分析的结果表明，环渤海湾苹果产区再植 障碍园与丰产园土壤主要菌群属于 Firmicutes 、 γ-Proteobacteria 、 Actinobacteria 、 α-proteobacteria。 筛选获得了一株对苹果常见土传病害菌层出镰刀菌、串珠镰刀菌有明显抗性的拮抗 菌，和一株能够明显降低土壤中根皮苷含量的降解菌。降解菌的盆栽效果已经得到验证， 拮抗菌的实际生产效果还需检验。 实验结果表明，环渤海湾苹果产区再植障碍园与丰产园土壤细菌群落结构存在明显 差异，Tenericutes、Actinobacteria 和 γ-Proteobacteria 这三种门类的细菌数量及所占比例 变化是导致差异性的原因之一，且其中 Tenericutes 和 γ-Proteobacteria 的数量变化与土 壤中 Cu 的含量具有一定的相关性。筛选获得的根皮苷降解菌可以???效的降低根皮苷对 苹果的自毒作用。 关键词：土壤细菌多样性，苹果再植障碍，T-RFLP，DGGE  Analysis about genetic diversity of soil bacteria in replant and fertility apple orchard in Bohai apple-planting area Abstract In this study, we used T-RFLP and DGGE to study and compare soil bacterial diversity and community structure of three samples which had serious replant problem. With relevant environmental data, we used the PCA, CCA and other statistical method to evaluating the changes in soil bacterial communities associated with replant problem. Though analysised the culturable bacteria in soil sample which from nine sampling points in apple-producing areas around the Bohai area. We got a strain of antagonistic bacteria which had good resistance to the apple common soil-borne diseases, and a stain of bacteria which had effective degradation of phloridzin（the main autotoxic agents of apple）. The result of diversity an