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高等动物酶合成的诱导 为了适应环境的需要,动物机体的酶合成会随着机体的需要增强或减弱,甚至停止。如动物长期食用脂肪含量不多的食物,其组织中含有一定量的脂酸合成酶,如果改食含脂肪多,糖类少的食物,很快就可发现这个动物组织中完全无脂酸合成酶。再改食低脂肪,高糖类饲料,其组织中的脂酸合成酶又复出现。 某些药物对酶合成的诱导功能的发现为药理学、毒理学研究和应用打开了新的思路。例如,苯巴比妥还可诱导肝葡萄糖醛酸基转移酶。临床上可以给予苯巴比妥加速游离胆红素的结合与排泄,治疗新生儿溶血性黄疸和某些体质性黄疸。 二、蛋白质的生物合成过程 蛋白质的合成过程相当复杂,整个过程涉及到三种 RNA(mRNA、tRNA和rRNA),几种核苷酸(ATP,GTP)以及一系列酶、蛋白质、辅助因子等。 1,氨基酸的活化 tRNA在氨基酰-tRNA 合成酶的帮助下,能够识别相应的氨基酸,并通过tRNA氨基酸臂的 3-OH 与氨基酸的羧基形成活化酯-氨基酰-tRNA。 氨基酰-tRNA的形成是一个两步反应过程:第一步是氨基酸与 ATP 作用, 形成氨基酰腺嘌呤核苷酸; 第二步是氨基酰基转移到 tRNA 的 3-OH 端上, 形成氨基酰-tRNA。 每一种氨基酸至少有一种对应的氨基酰-tRNA 合成酶。它既催化氨基酸与 ATP 的作用, 也催化氨基酰基转移到 tRNA。 氨基酰-tRNA 合成酶具有高度的专一性。 每一种氨基酰-tRNA 合成酶只能识别一种相应的 tRNA。 tRNA 分子能接受相应的氨基酸, 决定于它特有的碱基顺序, 而这种碱基顺序能够被氨基酰-tRNA 合成酶所识别。 大肠杆菌和其他原核细胞的蛋白质合成都从甲硫氨酸开始,但并不是以甲硫氨酸-tRNA作为起始物,而是在甲酰化酶催化后以N-甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAf)形式作为肽合成的起始物。 肽合成完成后,有专一性的酶将N-甲酰甲硫氨酸从肽链的 N 端切除。 2,肽链合成的起始 在大肠杆菌中, mRNA在起始因子3(IF3,分子量为21000的蛋白质)的参与下,首先与核糖体的30S 亚基结合,形成mRNA-30S- IF3复合体,然后在起始因子1(IF1,分子量约为1000的蛋白质)和起始因子2(IF2,分子量约为8000的蛋白质)参加下,与fMet-tRNAf、GTP结合,并释放出IF3,形成一个30S起始复合物:30S核糖体亚基-mRNA-fMet-tRNAf、GTP。 (1)大肠杆菌70S起始复合物的形成 这个复合物再与50S亚基结合,形成具有生物学功能的70S起始复合物。同时,GTP水解成GDP和磷酸,释放出起始因子IF1和IF2。这时,fMet-tRNAf占据了核糖体上肽酰位点(P位点),空着的氨酰-tRNA准备接受另一个氨酰tRNA,为肽链的延伸作好了准备。 首先eIF2-GTP使Met-tRNAi与40S亚基结合形成40S 起始复合物,5′-帽子结合蛋白(cap-binding protein,CBP)与mRNA的5′-帽子结合,eIF3与mRNA 5′端的AUG相识别。eIF4则促使ATP水解成ADP,提供反应的能量。eIF5诱导eIF2和eIF3参与Met-tRNAi与AUG识别后的释放。在eIF4的作用下,促使eIF2-GTP中的GTP水解为GDP,一起离开复合体,最后核糖体的60S 亚基结合到复合体上,eIF4被释放,从而形成80S起始复合物。 3,肽链的延伸 肽链的形成 肽酰基从P位点转移到A位点,同时形成一个新的肽键,即进入A 位点的氨酰-tRNA上的氨基与P位点上的肽酰-tRNA上的羧基之间形成一个新的肽键。 这一步需要50S核糖体上的蛋白质因子即肽酰转移酶参加。同时P 位点上的tRNA卸下肽链成为无负载的tRNA,而A位点上的tRNA这时所携带的不再是一个氨基酸而是一个二肽。这一步反应还需要有较高浓度的K+与Mg2+参加。 4,多肽链合成的终止和释放 肽链合成的终止包括两个步骤:(1)对mRNA上终止信号的识别;(2)完工的肽酰- tRNA酯键的水解,以便使新合成的肽链释放出来。 mRNA上肽链合成的终止密码子为UAA、UAG、UGA。三种蛋白质因子(RF1、RF2、RF3)参与这一步反应。 RF1用以识别密码子UAA、UAG。RF2帮助识别UAA、UGA。RF3不能识别任何密码子,但能协助肽链释放,RF1或RF2可能还可以使P位点上的肽酰转移酶活力转变为水解酶活力,从而使肽酰- tRNA不再转移到氨酰-tRNA上,而脱落进入溶液中。一旦tRNA从70S核糖体上脱落,该核糖体就立即离开mRNA,解离成50S和30S亚基,重新投入到新一轮反应中去。RF3与30S亚基结合后,可防止50 S与30S亚基的聚合。 第四节 遗传信息表达
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