人原代支气管上皮细胞简易分离和培养.PDFVIP

第３５卷　第１０期 新乡医学院学报 Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．１０ ·８５４· 　 　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　 　 ２０１８年１０月 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｃｔ．２０１８ 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉 欁 氉 本文引用：谢冬，翟成凯，刘影影，等．人原代支气管上皮细胞的简易分离和培养［Ｊ］．新乡医学院学报，２０１８，３５ 欁 欁 【基础研究】 欁 （１０）：８５４８５７，８６４．ＤＯＩ：１０．７６８３／ｘｘｙｘｙｘｂ．２０１８．１０．００３． 氉欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉 人原代支气管上皮细胞的简易分离和培养 １ １ ２ ２ ２ １ 谢　冬 ，翟成凯 ，刘影影 ，赵　乐 ，张彬彬 ，吴卫东 （１．新乡医学院公共卫生学院，河南　新乡　４５３００３；２．新乡医学院附属新乡市第一人民医院呼吸科，河南　新乡　 ４５３０００） 摘要：　目的　建立一种实验环境更贴合人体、方便快捷、细胞活性和纯度较高的支气管上皮细胞原代培养方 法。方法　通过纤维支气管镜刷检获取新乡市第一人民医院收治的６３例患者正常的支气管上皮细胞，采用无血清的 支气管上皮细胞培养基（ＢＥＧＭ）进行纯化、分离，行原代培养并传代，锥虫蓝染色，光学显微镜下观察细胞存活状态并 测定细胞存活率，通过倒置生物式显微镜和免疫组织化学染色观察鉴定细胞。结果　人支气管上皮细胞的平均存活 率为（９６．８±０．５）％，细胞免疫荧光角蛋白染色阳性，兔抗人细胞角蛋白８单克隆抗体免疫组织化学染色显示细胞质 着色为绿色，细胞核复染为蓝色，鉴定为人原代支气管上皮细胞。结论　经纤维支气管镜刷检获取并采用无血清 ＢＥＧＭ培养人原代支气管上皮细胞操作简便、快捷有效，细胞存活率较高，能够提高上皮细胞纯度，可以为研究呼吸系 统疾病提供良好的模型。 关键词：　人支气管上皮细胞；原代培养；鉴定 中图分类号：Ｑ８１３．１　文献标志码：Ａ　文章编号：１００４７２３９（２０１８）１００８５４０５ Ｓｉｍｐｌｅｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｕｌｔｕｒｅｏｆｈｕｍａｎｐｒｉｍａｒｙｂｒｏｎｃｈｉａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ １ １ ２ ２ ２ １ ＸＩＥＤｏｎｇ，ＺＨＡＩＣｈｅｎｇｋａｉ，ＬＩＵＹｉｎｇｙｉｎｇ，ＺＨＡＯＬｅ，ＺＨＡＮＧＢｉｎｂｉｎ，ＷＵＷｅｉｄｏｎｇ （１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈ，ＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｘｉａｎｇ４５３００３，ＨｅｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＲｅｓｐｉｒａｔｏ ｒｙＤｉｓｅａｓｅ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＸｉｎｘｉａｎｇＣｉｔｙ，ＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｘｉａｎｇ４５３０００，ＨｅｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｏｆｐｒｉｍａｒｙｃｕｌｔｕｒｅｏｆｂｒｏｎｃｈｉａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｗｉｔｈｍｏｒｅｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｈｕ ｍａｎｂｏｄｙ，ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ，ｈｉｇｈｃ