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低温对杂交鲤组织酶、消化酶的影响 张跃环 陈斌 （大连水产学院，生命科学与技术学院 辽宁 大连 116023） 摘要：杂交鲤在实验室 3℃、5℃、8℃、23.5℃的条件下驯化 7天，对其肝中三种组织酶，谷丙转氨酶（GPT）、 过氧化氢酶（CAT）、碱性磷酸酶（AKP）及肝与肠中的两种消化酶，蛋白酶、淀粉酶进行了测定。结果表 明：肝中组织酶 CAT、GPT分别在 12.02℃、19.00℃时酶活最高，酶活随温度的升高先增大后减小，CAT 变化显著（P0.05），而 GPT变化不显著（P0.05）。相反 AKP在 15.08℃时酶活最低，且变化显著（P0.01）。 消化酶中淀粉酶在 15.14±0.32℃时出现最大酶活，而蛋白酶在 13.55±0.04℃时酶活最低，淀粉酶与蛋白酶 的活性呈现相互祢补的趋势,变化差异显著（P0.05）。由此可见，14.81±2.38℃对杂交鲤而言是一个酶活变 化的临界温度。 关键词：低温，杂交鲤，组织酶，消化酶 杂交鲤为高寒鲤与建鲤正反杂交组合所获得的子一代，由于它生长快、产量高、饵料系 数低、抗病力强、抗寒性强等受到广大养殖户的青睐[1]。随着养殖业的发展，鱼类组织酶、 消化酶的研究越来越受到重视。国外对鱼类的消化酶研究较早，陈宝章等研究了淡水鱼类的 摄食行为与消化酶的关系[2]，Jones 等研究了肉食性、杂食性和草鱼蛋白酶活性[3]；国内学 者已对鲢、鳙、鲤、鲫、鳜、青、草等鱼类主要消化酶活性进行了完善的研究。对鱼类组织 酶的研究中，国外并不多见，国内徐镜波等研究了鲤鱼血清 GPT活性[4]，戴家银等研究了 铜锌对真鲷幼鱼组织酶酶活的影响[5]，张辉等研究了 AKP在水产动物中的应用[6]。但是对 杂交鲤组织酶、消化酶的研究及低温条件对其的影响尚未见报道。本文报道了低温条件对杂 交鲤组织酶、消化酶的影响，旨在找到低温条件下评价鱼体健康与否及人工配合饲料的配方 提供科学依据。 1 材料和方法 1.1 材料 实验鱼，杂交鲤大小：体重 4.6±0.2g/尾，体长 7.2±0.4cm来自于大连黑石礁市场，在 实验室中分别用 20L水族箱，在 3℃、5℃、8℃、23.5℃条件下驯化 7天。 1.2. 粗酶液的提取 将鱼置于冰盘内解剖。快速取出肝、前肠，剔出外壁脂肪，用冰冷去离子水洗净内含物， 用脱脂棉小心拭干。用分析天平称取其 1g后，5 倍去离子水匀浆，然后离心 15min（3000r/s）， 取上清液 1ml保存在 4℃冰箱中，24h内测完。 1.3 酶活测定及酶活性定义 1.3.1组织酶的测定及酶活性定义 CAT酶活测定：钼酸铵法。CAT活性单位定义：100ml 血清中 37℃下，每 1min 分解 1umol的过氧化氢即 1 个酶活性单位。 AKP酶活测定：磷酸苯二钠法。AKP 活性单位定义：100ml血清中 37℃下，与底物作 用 15min，产生酚为 1mg 个活性单位。 GPT酶活测定：赖氏法。GPT活性单位定义：100ml 血清中 37℃下，与底物作用 30min， 产生丙酮酸为 1g 个活性单位。 1.3.2 消化酶的测定及酶活性定义 淀粉酶测定：碘—淀粉法。淀粉酶活性单位定义：在 37℃、30min内，100ml酶液的淀 粉酶能完全水解淀粉 10mg 时称为一个淀粉酶活单位 蛋白酶测定：福林—酚法。蛋白酶活性单位定义：在 37℃下每分钟水解酪素产生 1ug 1 酪氨酸为一个酶活力单位。 1.3.3 酶活性分析仪 采用 721 分光光度计，1cm 比色皿。组织酶中 CAT、AKP、GPT的测定分别在 405nm、 510nm、520nm处进行比色；消化酶中淀粉酶、蛋白酶的测定分别在 660nm、680nm处进行 比色测定。 1.4 数据处理 设置 3℃、5℃、8℃、23.5℃四个梯度，每个梯度 3 个重复组，每个重复组中取 2 尾鱼 按 1．2 进行消化酶、组织酶的测定，其结果采用 Excell 作图,同时利用 SPSS11.5 对数据进 行显著性与方差