利巴韦林合成总结.docVIP

利巴韦林 利巴韦林（ribavirin，RBV），又名病毒唑、三氮唑核苷，化学名1-β-D-呋喃核糖基-1H-1,2,4- 三氮唑-3-羧酰胺，分子式：C8H12N4O5，结构式如右下图所示。该药是一种高效广谱核苷类 的抗病毒药物，已列入国家基本药用品种，对至少12 种RNA 病毒和10 种DNA 病毒有强 效的抑制作用。 1 发酵法 1.1 反应原理[2-8] 在D-葡萄糖，肌苷，5′-腺苷或D-核糖的培养基中，加入1,2,4-三氮唑-3-羧酰胺（TCA） 和生物菌种，室温条件下培养2 ~ 8 d，即可制得利巴韦林，但转化率不高，仅在40% ~ 60%。 其中以D-葡萄糖为原料的制备简式如下，式中所用的生物菌种为：短杆菌、棒状杆菌、节 核杆菌、微球菌或杆菌等。 1.2优缺点 发酵法的优越性是可以直接从核糖或D-葡萄糖制备目标产物，操作简单，三废易于治 理，能耗小。不足之处在于：（1 ）微生物的培养一般在20 ~ 40℃下进行，容易产生杂菌；（2）三氮唑核苷容易分解，收率低；（3）必须长时间培养，发酵液中的各种核苷、三氮唑核苷磷酸化物及其它代谢产物，使精制分离困难；（4）必须每次培养微生物，成本高；（5）原料单耗大，如葡萄糖用量560∶1，TCA用量19∶1。可见该法还需进一步深入研究。 2 酶促法 2.1 反应原理 以肌苷，鸟苷，黄苷或D-核糖-1-磷酸酯与1,2,4-三氮唑-3-羧酰胺（TCA）为原料，在 核苷磷酸酯酶（PN Pase）的作用下合成利巴韦林，转化率54.1% ~ 95%不等。以鸟苷为例， 其反应式如下。式中所用的核苷磷酸酯酶（PN Pase）可由乙酰短杆菌ATCC39311或TQ-952 作酶源，培养获得。 2.2 优缺点 酶促法[9-20]具有以下优点：（1）在微生物不增殖条件下，以较高的温度（40 ~ 60℃） 反应，几乎没有杂菌污染，三氮唑核苷的分解反应受到抑制，收率提高。（2）反应时间短， 副产物少，分离精制容易。（3）核糖供体可以从多种核苷、核苷酸中选择，来源广泛。（4） 操作简便、环境污染小、能耗小。 酶促法的工业化市场前景广阔。美国ICN 制药公司在上世纪80 年代末就开始用酶促法 实现工业生产利巴韦林，但总收率较低，仅55% [21]。我国在酶促法合成利巴韦林研究中提 出了双酶法制备[22-23]，使转化率提高到95%以上。湖北潜江制药股份有限公司采用双酶法 生产利巴韦林的产率达85%，成本降低了50%，年产能力达350 吨[24]。但为使酶促法趋于 完善，在酶源的制备、保存和重复利用等方面还需进一步研究。 3 化学法 国内外研究和报道最多的就是利巴韦林的化学法合成。化学法总体可分为卤代糖法、肌 苷法、腺苷法和核苷酸法四种[25]，主要经由酰化、缩合与氨解三步完成。 3.1 肌苷法 该法是化学法中研究最为广泛的，其以肌苷为起始原料，经酰化反应制得四乙酰核糖； 然后与1,2,4-三氮唑-3-羧酸甲酯（TCM）熔融缩合，再经氨-甲醇溶液氨解，得到目标产物。 反应式如下： 缺点：高温下（162 ~ 165℃）易使四乙酰核糖分解，影响收率和质量 优点： 1. BSA（N,O-二(三甲基硅烷基)乙酰胺）作硅烷化试剂， CF3SO2OSi(CH3)3作催化剂下缩合，使收率提高到83.4%。 2 .献[31-33]中提到使用SnCl4作催化剂，且反应条件温和，易操作。 3.2 核苷酸法 该法以核苷酸为起始原料，先经水解制得核苷，再经乙酰化反应制得四乙酰核糖，然后 经缩合、氨解反应合成目标产物。反应式如下。 文献[29]对此进行了较为详尽得报道，反应时间长，收率为51%。可见，核苷酸法制取 利巴韦林还有待进一步改进。 3.3 腺苷法 该法以腺苷为起始原料，先切断与乙酰化一步实现，制得四乙酰核糖，再经缩合、氨解 制得目标产物。 3.4 卤代糖法 该法是先将四乙酰核糖溴化物与三氮唑羧酸甲酯（TCM）高温缩合反应，再经氨解反 应制得目标产物。文献[1]对此进行过报道，反应式如下。 此方法由于反应时间长，收率低，缩合反应温度高，易使四乙酰核糖溴化物分解等缺陷， 目前已不再使用。 4 结论 目前利巴韦林的合成主要包括化学法、酶促法与发酵法三种；其中化学法研究与报道最 为广泛；酶促法具有很大的工业化市场前景；发酵法仍存在许多不完善之处，还有待进一步 研究。