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基因工程
基因工程是狭义的遗传工程,遗传工程的核心是构建重组DNA分子。
基因工程也称为“重组DNA技术”。
工具酶的发现和基因工程的诞生
基因工程的理论基础:DNA是遗传物质,DNA的双螺旋结构,以及遗传信息的传递方式。
基因工程的技术保障:限制性核酸内切酶,DNA连接酶和质粒载体发现与应用。
一、限制性核酸内切酶:能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。(平末端和黏性末端)
限制性核酸内切酶可作为切割DNA分子的手术刀,它的发现和应用,使DNA重组成为可能。
二、DNA连接酶:将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起,形成的DNA分子称为重组DNA分子。DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用。
三、质粒:能够自主复制的双链环状DNA分子,它们在细菌中以独立于大型DNA分子之外的方式存在,是一种特殊的遗传物质。最常用的是大肠杆菌的质粒,其含有抗生素抗性基因。
标志基因工程诞生的试验:通过重组,使大肠杆菌同时具有四环素和卡那霉素的抗性。
四、基因工程的载体
载体是运载外源DNA进入宿主细胞的车子,即运载工具。除质粒外,基因工程载体还有 入噬菌体、植物病毒和动物病毒。
入噬菌体:将外源基因载入大肠杆菌等宿主细胞。
植物病毒:将外源基因带入植物细胞。
动物病毒:将外源基因带入动物细胞。
基因工程的原理和技术
基因工程的基本原理是让人们感趣的基因(目的基因)在宿主细胞中稳定和高效表达。
基因工程的基本要素:工具酶、目的基因、载体和宿主细胞。
基因工程的基本操作步骤:A目的基因的获得;B重组DNA的形成;C重组DNA导入受体细胞(宿主细胞);D筛选含有目的基因的受体细胞;E目的基因的表达。
一、获得目的基因
目的基因序列已知:化学合成方法合成目的基因,PCR扩增目的基因。
目的基因序列未知:构建基因文库。
二、形成重组DNA分子
用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体,两者形成相同的黏性末端,然后用DNA连接酶将目的基因和载体连接在一起,形成重组DNA分子。
三、将重组DNA分子导入受体细胞
受体细胞:大肠杆菌,枯草杆菌,酵母菌和动植物细胞等。
质粒做载体:受体细胞应该选择大肠杆菌,用氯化钙处理大肠杆菌,增加其细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。
四、筛选含有目的基因的宿主细胞
载体上含有抗性基因,含有重组质粒的受体细胞可以在抗性培养基中生长。
五、目的基因的表达
目的基因在宿主细胞中表达,产生人们需要的功能物质。
基因工程的应用
一、基因工程与遗传育种
转基因植物:基因工程克服了远缘亲本难以杂交的障碍。
转基因动物:指转入了外源基因的动物。
传统的育种方法费时,费力。
二、基因工程与疾病治疗
1、基因工程药物:生长素释放抑制激素,胰岛素,生长激素,干扰素,乙型肝炎疫苗等。
胰岛素:一种蛋白质激素。
干扰素:干扰素是病毒侵入细胞后产生的糖蛋白。干扰素具有抗病毒、抗细胞分裂、免疫调节等多种生物学功能,是治疗病毒性肝炎和肿瘤的药物。
2、基因治疗:是向目标细胞中引入正常功能的基因,以纠正或补偿基因的缺陷,达到治疗的目的。
三、基因工程与生态环境保护
利用基因工程技术来改善环境。如:利用转基因微生物吸收环境中的重金属,降解有毒化合物和处理工业废水。
基因工程的发展前景
一、科学家在基因工程方面的最新尝试
光合作用:植物和某些细菌(蓝藻,又名蓝细菌,是一种原核生物)。
生物固氮:自生固氮微生物、共生固氮微生物和联合固氮微生物。
自生固氮微生物:A光合固氮微生物B化能自养固氮微生物C异养固氮微生物
生物反应器:利用转基因的栽培植物和饲养动物来生产蛋白药物或者疫苗,将动植物作为生物反应器,希望降低产品价格。
蛋白质工程:利用基因工程对天然蛋白质进行改造,以便获得具有理想生物学功能的蛋白质。蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的。
二、基因工程的未来
第二章 克隆技术
生命的基本特征之一:自我复制和自我繁殖。
繁殖分为无性繁殖和有性繁殖。
有性繁殖:经过异性生殖细胞的结合,产生合子,再由合子发育成下一代个体的繁殖方式。
无性繁殖:不经过异性生殖细胞的结合,直接由母体产生下一代个体的繁殖方式。
无性繁殖的个体保持了亲本的遗传性状,一次产生后代的数量可以很大,可以迅速扩大其种群数量。
什么是克隆
个体通过无性繁殖可连续传代并形成群体,这样的群体称为无性繁殖系,即克隆。
克隆技术:从众多的基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择,获得目的基因或特定类型细胞的技术操作。
当用于个体水平的描述时,克隆是一种通过单个细胞,特别是来自特定个体的单个体细胞进行无性繁殖,从而产生新个体的过程或技术。
一、无性繁殖与克隆
只要不通过两个分子、两个细胞或两个个体的结合,只由一个模板分子、母细胞或母体直
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