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高中生物课件:基因工程的原理和技术(浙科版选修三)
第二节 基因工程的原理和技术
温故而知新
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
质粒——载体
基因工程操作的工具
基因工程的原理和技术
1、筛选含有目的基因的受体细胞
2、目的基因的表达
步骤一 获得目的基因
人工合成
利用PCR技术扩增
已知序列:
从基因文库获得
未知序列:
( DNA library )
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)
氢键断裂,形成单链DNA。
引物与DNA模板结合,形成局部双链。
在酶的作用下,不断延伸,合成双链DNA。
多次循环,获得大量双链DNA分子。
PCR技术扩增
鸟枪法:散弹射击法
从基因文库获得
人工合成法
逆转录法
根据已知氨基酸序列直接合成DNA
步骤二 形成重组DNA分子
步骤三 将重组DNA分子导入受体细胞
1.基因工程中常用的受体细胞有哪些?
2.导入过程如何?
大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞
借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径
步骤四 筛选含有目的基因的受体
利用标记基因来筛选:
通过检测标记基因的有无,(或利用标记基因体现的性状)来判断目的基因是否导入受体细胞。
对目的基因进行分子水平的检测:
通过合成标准探针,利用DNA杂交技术来进行目的基因的检测。
步骤五 目的基因的表达
1、通过鉴定目的基因的产物蛋白来确定目的基因的表达。
2、目的基因导入受体细胞后,受体细胞(或受体细胞发育来的生物体)会表现特定的性状,通过性状的观察来确定目的基因的表达。
谢 谢
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