骨髓淋巴细胞分离液试剂盒使用说明.docVIP

骨髓淋巴细胞分离液试剂盒使用说明 　　骨髓淋巴细胞分离液试剂盒使用说明 　　规格：4×200mL/kit 　　保存：18-25℃保存，有效期2年。骨髓淋巴细胞分离液试剂盒易感染细菌，需无菌条件下操作。无菌条件下操作，启封后置于常温保存。如4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。 　　试剂盒内容： 　　动物骨髓淋巴细胞分离液 　　样本稀释液 　　清洗液 　　F液200mL200mL200mL200mL 　　一、各种动物骨髓细胞的采集方法 　　1.大鼠、小鼠骨髓的采集：用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨，用注射器吸取少量的F液，冲洗出胸骨或股骨中全部骨髓液，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃上清。沉淀以F液重复洗涤一次后用全血及组织稀释液悬起（细胞浓度为2×108-1×109个/mL），备用。 　　2.大动物骨髓的采集： 　　A．骨髓穿刺点定位 　　（1）胸骨：穿刺部位在胸骨中线,胸骨体与胸骨柄连接处,或选胸骨上1/3部。 　　（2）胫骨：穿刺部位在胫骨内侧,胫骨上端的下方1厘米处。 　　（3）肋骨：穿刺部位在第5～7肋骨各自的中点上。 　　（4）髁骨：穿刺部位在髁前上棘后2～3厘米的髁嵴。 　　（5）股骨：穿刺部位在股骨内侧面,靠下端的凹面处。 　　B．骨髓穿刺方法 　　（1）实验动物按要求固定，穿刺部位去毛、消毒、麻醉，要求局部麻醉范围直达骨膜，也可作全麻。