大鼠灌注固定取,解剖取材.pptxVIP

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  • 2018-12-19 发布于江苏
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大鼠灌注固定取,解剖取材

大鼠灌注固定取脑; 用途 1.用于常规HE染色,免疫组化分析。 2.冰冻切片可以不做脑组织固定。 3.不可用于western blot和PCR。 4.如果观察脑组织的缺血、损伤或其它病变时,不作灌注 固定,而是在取出脑组织后作固定,将大大影响效果。;原理 心脏灌流术能够快速冲净血液并在动物死 亡前进行组织的前固定,避免了组织的自溶 现象,是脑组织切片观察的常用方法。多聚 甲醛使组织蛋白发生交联,以保持蛋白的 原位和表面结构不变,从而能使其对应的抗体,准确检测其表达的位置和量。 ; 必要性 1.脑组织较软,且细胞成分不易保留,脑组织是较易软化的组织之一,血供 也较为丰富,所以最好是在取脑组织前用4%多聚甲醛灌注固。 2.经前固定后,取脑操作时,可减少脑组织损伤。 3.脑内血液都在,HE染色后,可去除红细胞背景影响;流程 麻醉 开胸 心尖向左心室穿针 剪开右心耳 生理盐水冲洗 4%多基甲醛固定 取脑 保存或切片.;具体过程

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