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乙型肝炎表面抗原重组酵母的组建 H BsAg基因重组表达质粒pLS1和pLS2的构建 这个质粒在乳酸克鲁维酵母及大肠杆菌中都能复制 Xba I Sal I 插入片段的方向通过电泳检查Xba I和Sal I双酶切片段的大小来确定 2 重组表达质粒的转化及H BsAg的表达 人组织型纤溶酶原激活剂组合突变株CHO 细胞株的组建 真核表达质粒pLFrGGI的构建 FrGGI SV40E Ad M LP SV40P 采用二氢叶酸还原酶的竞争性抑制剂氨甲喋呤(M T X)选择加压共扩增 外源基因。 2 高效表达FrGGI（t P A突变体）的C H O 细胞株的获得 以两个引物所结合的单链cDNA (靶序列)为模板,在Taq 聚合酶的作用下进行PCR 扩增,合成双链目的cDNA (1)聚合酶链式反应（PCR ）体外扩增DNA 技术 Polymerase chain reaction 应用该技术可在很短的时间内得到数百万个特异DNA 序列的拷贝 宏观与微观的联系 PCR 技术的基本原理：首先使双链DNA 在反应液中热变性而分开成单 链，然后在低温下与两个引物进行退火，使引物与单链DNA 配对结合 ，再在中温下利用Taq DNA 聚合酶的聚合活性及热稳定性进行聚合（