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- 2018-12-19 发布于福建
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利用荧光时显微技术研究生物单分子
利用荧光显微技术研究生物单分子 光学单分子方法的进展 近20 年来, 光学探测方法有了长足的进步。在80 年代出现并逐渐成熟起来的近场显微术为超衍射极限分辨成像提供了基本手段, 同时也使光学显微术进入了纳米科学的领域。而共焦显微术不仅突破传统光学的衍射极限, 而且为光学探测引入了第三维空间信息, 使光学探测具有了层析能力, 实现了真正的空间三维成像。 超短脉冲激光技术直接导致了多光子荧光显微术的成功。尤其是飞秒激光激发的荧光显微术, 对于提取时间分辨的信息是有力的工具。这种荧光单分子探测及单分子光谱探测与其数据处理方法的组合, 形成了荧光共振能量转移的探测方法。通过该方法可以获得1.5 纳米~ 8 纳米的空间分辨率的构像信息, 达到光学方法上最高的分辨率。 以上近场、共焦、荧光显微术和荧光共振能量转移四种基本技术构成了目前活跃的生物单分子探测的光学平台。 Myosin V 的两种运动模型 单分子荧光技术检测运动模型 把一个荧光分子标记在myosin V 的一条腿上,再用荧光显微镜来对标记的荧光分子进行检测。据此来研究myosin V的迈步过程。 远场和近场光学检测 主动或被动发光的原因是物体受激发之后,内部电偶极跃迁引起电磁场的辐射,电磁波从物体表面向自由空间传播。 物体表面以外的场分布可以划分为两个区域: 距物体表面仅几个波长内区域,这一区域称为近场区域; 近场区
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