Cry#x02162;A基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化.pdfVIP

Cry#x02162;A基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化.pdf

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草 业 学 报 第 卷 第 期 248-256 23 1                 年 月 , 2014 2 ACTAPRATACULTURAESINICA Vol.23No.1         犆狉 犃基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化 狔Ⅲ , , 12 2 2 3 12 1 尤佳 ,张宁 ,文义凯 ,吴家和 ,司怀军 ,王蒂 ( 甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地 甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室,甘肃 兰州 ; 1. 730070 甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃 兰州 ; 中国科学院微生物研究所植物 2. 7300703. 基因组学国家重点实验室,北京 100101) 摘要:利用 InFusion技术将酶切位点不匹配、目的基因内部含载体酶切位点的犆狉 犃基因和植物表达载体  狔Ⅲ BI121相连接,分别成功构建了组成型启动子 CaMV35S和马铃薯茎叶特异表达启动子 STLS1驱动的犆狉 犃 p 狔Ⅲ 基因植物表达载体。利用冻融法将 个重组质粒转入根癌农杆菌 ,转化马铃薯栽培品种陇薯 号和甘农 2 LBA4404 3 薯 号获得了转化植株,经卡那霉素筛选和 检测,共有 株阳性植株 基因成功整合到马铃薯基因组 2 PCR 10 犆狉 犃 狔Ⅲ 中。经实时荧光定量 检测表明, 基因在 驱动的 转基因植株的根、茎、叶中均有表 PCR 犆狉 犃 CaMV35S 犆狉 犃 狔Ⅲ 狔Ⅲ 达,且在叶中表达量较高,茎和根次之;在马铃薯茎叶特异表达启动子 STLS1驱动的犆狉 犃转基因植株中,在根 狔Ⅲ 中未见表达,仅在茎、叶中表达,且在叶中表达量较高。 关键词: ; 基因;表达载体;马铃薯;遗传转化 InFusion犆狉 犃

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