dna损伤响应基因rad9 rad1和hus1在小鼠不同组织中转录水平的差异以及它对辐射的应答.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 中国科学技术大学 硕士学位论文 DNA损伤响应基因Rad9、Rad1和Hus1在小鼠不同组织中转录水平 的差异以及它们对辐射的应答 姓名：方钰 申请学位级别：硕士 专业：生物化学与分子生物学 指导教师：杭海英 摘要 随着辐射技术应用的日益普及，人类接触到电离辐射的机会越来越频 繁，而电离辐射本身就是一种突变剂与致癌剂。因此，对于电离辐射的生 物学效应以及损伤修复机制的研究，对有效利用辐射资源并同时保障相关 人员的安全十分重要。 Rad9、Radl和Husl是一组存在于真核细胞中、在进化上高度保守的 基因，它们的蛋白质产物可以形成Rad9．Radl．Husl异三聚复合体。它们能 够参与到DNA的损伤修复、细胞周期调控和细胞凋亡等多个生理过程，在 维持基因组的稳定性和抗辐射响应上发挥着重要的作用。 目的：目前已经有研究显示，在人的不同组织中，DNA损伤修复基因 的转录水平是不同的；在DNA受到辐射损伤后，DNA修复基因的转录水 平也不相同。但是关于Rad9、Radl和Husl在正常组织中的转录情况，如 它们三者之间的转录水平是否具有相关性，在不同组织中的转录水平是否 一致，以及作为修复基因，在电离辐射照射造成损伤后，是否是以一个复 合体的形式参与到修复过程中，这些都没有相关的报道。因此本课题利用 正常小鼠作为模型，对这些问题进行了系统的研究。 方法：我们利用实时荧光定量PCR技术进行研究。首先对雌雄两种不 同性别的小鼠各个组织中的Rad9、Radl和Husl基因转录水平进行了比较 分析。其次，用10 Gy的丫射线对小鼠进行全身照射，分别在照射后的2 h、 6 h、12 h、24 h和48 h取小鼠的不同组织，检测Rad9、Radl和Husl基因 的转录水平变化，以没有辐射照射的小鼠作为空白对照。 结果：在小鼠的不同组织中，Rad9、Radl和Husl这三个基因各自的 转录水平是不同的，但是在同一组织中，它们相互之间在转录水平上却具 有相关性，其中Radl和Husl间的相关性最好，而且雌雄小鼠间在基因的 转录水平上没有差异。电离辐射照射之后，在同一组织中，Rad9、Radl和 Husl基因相互间的转录水平不具有相关性，Radl基因的转录水平基本没有 变化：Rad9和Husl的转录水平发生了变化，并且在某些时间点转录水平的 变化是上升的，但是损伤的响应时间都不同。这表明，这三个基因对于辐 射的响应不具有相关性，因而推测它们的辐射响应机制存在着差别。 关键词：辐射 Rad9 Radl Husl 实时荧光定量PCR基因 转录水平  Abstract Ionizing radiation could be found throughout the environment and is a potential hazard for human beings because it is both a mutagen and a carcinogen．So it is particularly important to study the biological effects of ionizing radiation and the mechanisms of damage repair that caused by ionizing radiation．These data will provide valuable information on the risk assessment and protection of ionizing radiation． Rad9，Rad 1 and Hus l are conserved from yeast to humans．They can form a heterotrimer complex(the 9-l-l complex)that participates in the DNA damage repair, cell cycle checkpoint activation and apoptosis in eukaryotic cells．They play important roles in the maintenance of genome integrity and cellular responses to ionizing radiation． Purpose：It has been reported that in different human tissues，the expression levels of DNA damage repair genes are differen