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细胞生物学研究中的激活剂和抑制剂 Anandika Dhaliwal Ph.D. anandika dot dhaliwal at gmail dot com Rutgers University, New Jersey, United States 译者 王秀英博士 mary at labome dot com 美国新泽西州普林斯顿合原研究有限责任公司 (Synatom Research) DOI /10.13070/.3.185 日期 更新 : 2013-10-19; 原始版 : 2013-04-27 引用 实验材料和方法 2013;3:185 介绍 细胞生物学研究细胞结构、生理特性及细胞功能。它涉及到对细胞器、细胞与周围环境间相互作用、生命周期、分化及死亡的研究。细胞生物学与遗传学、分子生物学、发育生物学和生物化学等其它生物学领域是密切相关的。 图 1.真核细胞骨架。肌动蛋白纤维显示为红色，微管为绿色，核为蓝色。肌动蛋白染色使用的是罗丹明-鬼笔环肽，微管使用的是连接有Alexa488的抗α微管蛋白着色剂，DNA则使用的是Hoechst染料。 对于细胞生物学领域的研究者而言，为了更加全面地理解细胞的功能、细胞的信号传递以及控制细胞命运、功能及表型的胞内机制，抑制剂与激活剂是至关重要的研究工具。许多抑制剂和激活剂都被广泛用于研究细胞动力学及功能。这里我们对真核细胞中各种细胞生物学研究如细胞内吞、分泌、粘附、细胞骨架动力学、内质网和高尔基体研究中常用的抑制剂和激活剂进行了综述。 细胞骨架 细胞骨架为细胞提供了特定的结构与形状。真核细胞主要有三种细胞骨架纤维：1）微丝，2）中间丝和3）微管。 微丝（肌动蛋白丝）：这是细胞骨架中最细的纤维。它们由肌动蛋白亚基的线性聚合物所组成，通过在纤维一端的伸长并伴随着另一端的收缩来产生力，从而使其间的纤维产生净移动。 中间丝：这种纤维的平均大小为直径10纳米并且比肌动蛋白丝更稳定（是紧密结合的），是细胞骨架的异质成分。中间丝负责组织细胞内部的三维结构和细胞器，是核纤层的结构性组成部分。它们也参与一些细胞-细胞间和细胞-基质间的连接过程。 微管：它们是直径为23nm的空心圆柱，大多数情况下由13条原纤维组成，而这些原纤维则是alpha微管蛋白和beta微管蛋白的聚合物。它们具有很高的动态活性，通过结合GTP来进行聚合反应并通常由中心体来组织。 抑制剂 靶点 机制 作用特点及效果 参考文献、来源及供应商 细胞松弛素D（C30H37NO6） 肌动蛋白 结合于肌动蛋白核和F-肌动蛋白的生长端，从而抑制聚合反应。诱导肌动蛋白解聚。 溶于DMSO和乙醇。抑制收缩。抑制依赖于p-53的细胞通路。引起G1-S转化过程中的细胞周期阻滞。抑制胰岛素刺激的葡萄糖转运。 [pm 3023337 , Sigma-Aldrich, EMD4Biosciences, Tocris Bioscience, Enzo Life Science, Invitrogen, Santa Cruz Biotechnology, Cayman Chemical Lantraculin A（C22H31NO5S） 肌动蛋白 扰乱微丝介导的过程。与G-肌动蛋白单体形成1:1的复合物（Kd = 200 nM）。 溶于DMSO和乙醇。比细胞松弛素的抑制效果强10-100倍。抑制巨噬细胞的吞噬作用。比Lantraculin B的效果更强。 HYPERLINK "/method/Activators-and-Inhibitors-in-Cell-Biology-Research.html#ref1"[1]HYPERLINK "/method/Activators-and-Inhibitors-in-Cell-Biology-Research.html#ref2"[2]HYPERLINK "/method/Activators-and-Inhibitors-in-Cell-Biology-Research.html#ref3"[3]HYPERLINK "/method/Activators-and-Inhibitors-in-Cell-Biology-Research.html#ref4"[4], Invitrogen, Tocris Bioscience, Sigma-Aldrich, Cayman Chemical, Santa Cruz Biotechnology, EMD4Biosciences Lantraculin B（C20H29NO5S） 肌动蛋白 体外反应中抑制肌动蛋白的聚合（Kd = 60 nM）。扰乱微丝的组织和微丝介导的过程。 溶于DMSO、甲醇或乙醇。比细胞松弛素的抑制效果强10-10