贺兰山紫蘑菇的化学成分及生物活性研究-生物工程专业论文.docxVIP

内蒙古大学硕上学位论文 内蒙古大学硕上学位论文 贺兰山紫蘑菇的化学成分及生物活性研究 摘要 贺兰山紫蘑菇，学名紫色丝膜菌(Cortinarius purpurascens Fr．)，主要分布 在我国内蒙古阿拉善盟贺兰山和宁夏贺兰山，是一类名贵野生大型食用真菌。近 年来，已经有很多野生真菌被报道有抗肿瘤、抗氧化等功效。因此，本实验以贺 兰山紫蘑菇为研究材料，针对其化学成分、抗氧化活性及细胞毒活性进行初步研 究。主要内容及研究结果如下： 1、将紫蘑经甲醇提取，有机溶剂萃取，应用各种柱层析和制备型高效液相 色谱等技术进行纯化后，共得到5个化合物。再经各种现代光谱技术(1H-NMR， 13C．NMR，HMBC，HSQC，H．H cosY,NOESY,UPLC．MS)，并结合参考文献数 据鉴定它们的化学结构分别为苯甲酸、壬二酸、油酸、亚油酸和sodagnitin E， 其中Sodagnitin E为首次从紫蘑菇中分离得到。 2、采用MTT法，选用了四种人类癌细胞对贺兰山紫蘑的各部分提取物及5 种化合物进行细胞毒活性分析。其中对于HepG2细胞、A549细胞、BGC．823 细胞的增殖，甲醇总提取物、乙酸乙酯相、石油醚相和sodagnitin E表现出明显 的抑制作用，并且有浓度依存性；对于Hela细胞的增殖，乙酸乙酯相、石油醚 相和Sodagnitin E表现出抑制作用，并且有浓度依存性。 3、利用酶标仪法筛选紫蘑各部分提取相及5个化合物的清除DPPH能力， 其中甲醇总提取物和乙酸乙酯相有清除DPPH活性，ECso值分别为267．6 I_tg／mL 和145．3 Iag／mL。利用琼脂糖凝胶电泳法检测样品对R00·引起的DNA损伤的保 护作用，其中乙酸乙酯相、石油醚相和正丁醇相可显著保护ROO·诱导DNA断 裂。利用t-BOOH损伤HepG2细胞，检测不同浓度样品对细胞内ROS的清除作 用。其中贺兰山紫蘑的甲醇总提取物、乙酸乙酯相、石油醚相和正丁醇相在对细 胞无毒的剂量时，能显著降低HepG2细胞内的ROS含量，起到保护作用。 结论：贺兰山紫蘑具有对多种癌细胞的增值有抑制作用，同时也具有较强的 抗氧化能力，可进一步开发为具有辅助抗癌、抗氧化效果的功能食品。 万方数据 内蒙古大学倾上学位论文关键词：贺兰山紫蘑菇；化学成分；细胞毒活性；sodagnitin 内蒙古大学倾上学位论文 关键词：贺兰山紫蘑菇；化学成分；细胞毒活性；sodagnitin E；抗氧化 万方数据 内蒙古大学硕上学位论文C唧MICAL 内蒙古大学硕上学位论文 C唧MICAL CONSITITUENTS AND BIOACTIVITIES OF CoRTjNARlUS PURPURASCENS ABSTRACT Cortinarius purpurascens Fr．(Zi Mo in Chinese)which is mainly produced in the Ho—lan Mountains of Inner Mongolia Alxa League and Ningxia，is a kind of edible fungus．In recent years，a lot of wild fungi have been reported to have antMumor，antioxidant and other biological effects．So，we conducted a preliminary study on the chemical constituents of Cortinarius purpurascens，and tested its antioxidant activity and cytotoxic activity．The main contents and results are as follows： 1．The Cortinarius purpurascens was extracted by methan01．Then the extract was partitioned with water and different organic solvents．Through various column chromatography and PHPLC purified，we got five compounds．Then through a variety of modem spectroscopic methods(1H-NMR，13C-NMR，HMBC，HSQC，H-H cosY, NOESY，UPLC-MS)，and comparison with the reference data，the chemical str