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- 2018-12-21 发布于福建
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淋病奈瑟菌耐药性与毒力岛的门研究-临床检验诊断学专业毕业论文
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淋病奈瑟菌耐药性与毒力岛的研究
中文摘要
【目的】
了解湛江和广州两地区淋病奈瑟菌的耐药现状和耐药水平;对淋病奈瑟菌的 毒力岛(PAIs)进行定位分析,阐明淋病奈瑟菌PAls在质粒及染色体上的分布情 况;初步探讨PAls与临床上常用抗生素耐药性的关系,明确携带有PAIs的菌株 的耐药水平,为淋病的治疗策略提供参考。
【方法】
1 对临床标本中分离的63株淋病奈瑟菌进行系统鉴定。
2 对淋病奈瑟菌进行抗生素敏感性试验:采用纸片扩散法(K.B法)测定63株 淋病奈瑟菌对19种抗生素的敏感性;采用琼脂稀释法测定47株淋病奈瑟茵 对5种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)。
3 采用碘量法检测淋病奈瑟菌B.内酰胺酶。
4 采用碱裂解法提取淋病奈瑟菌的质粒,分析其质粒谱。
5 采用碱裂解法提取淋病奈瑟菌的质粒及染色体DNA,PCR扩增各PAls基因 (atlA、traG、trail),对其进行定位分析。
【结果】
l 63株淋病奈瑟菌除1株分离自尿液之外,其余62株均分离自泌尿生殖道分 泌物。感染者均为成年人,其中男性60例,女性3例。
2 K—B法测定63株淋病奈瑟菌对19种抗生素的敏感性,结果显示:对洛美沙 星、四环素、环丙沙星、氧氟沙星、青霉素的耐药情况十分严重,耐药率分 别为88.89%、87.30%、85.71%、74.60%、73.02%。对阿奇霉素、氨曲南、 壮观霉素、头孢噻肟、头孢曲松敏感性较高,敏感率分别为98.41%、98.41%、 96.83%、95.24%、88.89%。对5种以上抗生素耐药的临床株共54株,占
85.71%o
3 琼脂稀释法测定47株淋病奈瑟菌对5种抗生素的敏感性,结果显示:对四 环素和环丙沙星的耐药状况非常严重,耐药率均为97.87%。对壮观霉素和 头孢曲松较为敏感,敏感率分别为91.49%和89.36%。
4 采用琼脂稀释法与K.B法测定47株淋病奈瑟菌对5种抗生素的耐药性,两 种方法的测定结果,差别均无统计学意义(P0.05)。
5 63株淋病奈瑟菌共检出产p.内酰胺酶的菌株即PPNG菌株21株,阳性率为
33.33%。B.内酰胺酶阳性菌株对青霉素和氨苄西林的耐药率高于阴性菌株, 其耐药率的差别有统计学意义(P0.05),对其它抗生素耐药率的差别无统计 学意义(PO.05)。
6 检测广州、湛江两地区淋病奈瑟菌对19种抗生素的敏感性,其中对青霉素、 四环素、壮观霉素、氨苄西林、氧氟沙星和氯霉素的耐药率差别有统计学意
义(PO.05),对其它抗生素的耐药率差别均无统计学意义(PO.05)。
7 63株淋病奈瑟菌的质粒总检出率为88.89%(56/63),共检出4.2kb、7.4kb、
39.5kb、42.5kb四种质粒,各种质粒检出率分别为33.33%(21/63)、
53.97%(34/63)、38.10%(24/63)、7.94%(5/63)。根据63株淋病奈瑟菌的质粒 检出情况,分为9种质粒谱型。以单一7.4kb、7.4kb+39.5 kb和单一4.2kb 最为多见,分别占30.16%、20.63%和17.46%。
8 以63株淋病奈瑟菌的染色体DNA为模板进行PCR扩增,atlA、traG和trail 的阳性检出率分别为74.60%(47/63)、34.92%(22/63)和68.25%(43/63)。以质 粒DNA为模板进行PCR扩增,atlA、traG和trail的阳性检出率分别为
74.60%(47/63),63.49%(40/63)和63.49%(40/63)。
9 将B一内酰胺酶阳性菌株与阴性菌株的毒力岛基因携带率进行比较,发现B. 内酰胺酶阳性菌株的染色体trail的携带率(47.62%)低于13-内酰胺酶阴性菌 株的携带率(78.57%),p.内酰胺酶阳性菌株的质粒at/A的携带率(57.
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