细菌代谢物的检测及鉴定.ppt

细菌的分类及鉴定 同济医院检验科 细菌的生物化学试验 原理：由于细菌各自的酶系统不同，新陈代谢的产物也有所不同，而这些产物又各具有不同的生物化学特性。为此，可利用生物化学的方法来鉴别细菌的类别，这种试验称为细菌的生化反应试验 常用检查方法 碳水化合物代谢试验 氨基酸和蛋白质代谢试验 碳源利用试验 呼吸酶类试验 抑菌试验 碳水化合物代谢试验 糖（醇、苷）类发酵试验 原理 由于细菌含有发酵不同糖类的酶，故分解糖的能力不同，终末产物亦不一致。 应用 鉴定细菌最主要的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要 。 氧化一发酵试验(O／F试验) 原理 氧化型：仅在有氧环境中分解葡萄糖 发酵型：在有氧或无氧环境中都能分解 葡萄糖 产碱型：在有氧或无氧环境中都不能 分解葡萄糖 结果： 两支培养基均无变化为产碱型； 两支培养基均产酸为发酵型； 若不加石蜡的培养基产酸为氧化型。 应用：肠杆菌科细菌（发酵型） 非发酵菌（产碱型/氧化型） 葡萄球菌（发酵型） 微球菌（氧化型） β-半乳糖苷酶试验 原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻-硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG)，而生成黄色的邻-硝基酚，在很低浓度下也可检出。 结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20～30min内显色。 应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本试验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。 七叶苷水解试验 原理： 七叶苷 七叶素 黑色化合物 培养基：七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。 结果：培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。 应用：D群链球菌（+） 其它链球菌（-） 甲基红试验 原理： 葡萄糖 丙酮酸 混合酸（pH ) 醇酮醛（pH ) 红色反应（+） 橘黄色（-） 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。 应用：大肠埃希菌（+） 产气肠杆菌（-） 肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性，而肠杆菌属则为阴性。 V-P试验 原理： 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 红色化合物（+） 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基 结果：在数分钟内出现红色为阳性；如无红色出现且于35 ℃ 4h后仍如故者即为阴性。 应用：常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。 产气肠杆菌（+） 大肠埃希菌（-） 蛋白质和氨基酸代谢试验 吲哚试验 原理 色氨酸 吲哚 玫瑰吲哚 （红色） 应用 肠道杆菌的鉴定。 大肠埃希菌（+） 沙门菌属（-） 硫化氢试验 原理 含硫氨基酸 硫化氢 硫化铅/硫化亚铁 （黑色） 应用 肠杆菌科菌属间的鉴定。 尿素（脲）酶试验 原理： 无色 尿素 氨 红色 应用：肠杆菌科中变形杆菌属的鉴定。 苯丙氨酸脱氨酶试验 原理 苯丙氨酸 苯丙酮酸 10%氯化铁 绿色化合物 应用：肠杆菌科的鉴定 变形杆菌属、摩根菌属、普罗威 登斯菌属（+） 氨基酸脱羧酶试验 原理：氨基酸 特异性脱羧酶 胺＋CO2 指示剂变色 应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如肺炎克雷伯菌赖氨酸为阳性，鸟氨