第十一至十八章说核酸的化学2011.ppt

第十二章 核酸通论Chapter 12. An Introduction  to Nucleic Acids 核酸（ Nucleic acids ）是一类重要的生物大分子，担负着生命信息的储存与传递。 核酸是现代生物化学、分子生物学的重要研究对象和领域。 第一节 核酸的发现和研究历史 第二节 核酸分类和分布 真核生物除mRNA、rRNA和tRNA外，还有许多种小分子RNA，如核内小RNA (small nuclear RNA， snRNA)、反义RNA (antisense RNA， asRNA)、dsRNA(double strand RNA)、smRNA、siRNA 和 miRNA等。 snRNA：它是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体（spilceosome）的主要成分，在RNA转录后加工中起重要作用。 asRNA: 可通过互补序列与特定的mRNA结合，抑制mRNA的翻译， asRNA除主要在翻译水平抑制基因表达外，还可抑制DNA的复制和转录。 2004年Tomoko Kuwabara 和他的同事们发现一种小dsRNA 能够作用于神经基因的表达，并且能在转录水平上直接诱导神经干细胞向神经细胞分化。 这种RNA在基因转录水平上直接参与调控，它被命名为smRNA(small non-coding RNA)。 双链RNA（dsRNA）经酶切后会形成很多小片段—siRNA (Small interfering RNA) 和 miRNA (microRNA)。 siRNA一旦与mRNA中的同源序列互补结合，会导致 mRNA 失去功能，即不能翻译产生蛋白质，也就是使基因“沉默”了。 第十三章 核酸的结构Chapter 12. The Structure  of Nucleic Acids 5′-磷酸核苷酸的基本结构 一、碱基、核苷、核苷酸的概念和关系  二、基本碱基结构和命名 核苷酸的结构和命名 常见（脱氧）核苷酸的结构和命名 三、几种稀有核苷 腺苷酸及其多磷酸化合物 cAMP(cGMP)的结构 六、 核苷酸的生物学功能 核酸分子中核苷酸之间的共价键 二、DNA 的一级结构 DNA一级结构的表示法 三、DNA碱基组成的Chargaff规则 DNA的双螺旋结构(Watson-Crick模型) DNA的双螺旋模型特点 DNA的双螺旋结构稳定因素 DNA的双螺旋结构的意义 DNA双螺旋的不同构象 三种DNA双螺旋构象比较 DNA分子间的三链结构 五、DNA的三级结构 螺旋和超螺旋电话线 DNA超螺旋的形成 超螺旋状态的定量描述 DNA超螺旋结构形成的意义 原核生物两类拓扑异构酶 原核拓扑异构酶I的作用机制 拓扑异构酶II的作用机制 六、DNA与蛋白质复合物的结构 动物病毒切面模式图 噬菌体T2结构 细菌拟核（nucleoid ）的突环结构 组蛋白与DNA的结合 真核生物染色体DNA组装不同层次的结构 一、RNA的一级结构 二.tRNA的结构 酵母tRNA Ala 的二级结构 tRNA的三级结构 三、rRNA的分子结构 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 第十四章 核酸的物理化学性质Chapter 14. The Physico-Chemical Properties of Nucleic Acids 核苷酸的解离曲线 DNA的紫外吸收光谱 DNA的变性过程 Tm：熔解温度（melting temperature） 分子杂交的原理示意图 Southern印迹法 第十五章 核酸的研究方法Chapter 15. The experimental method for Nucleic Acids Research 第一节 核酸的提取、分离和 定量测定 2. DNA的分离 浓盐法： 3. RNA的分离 制备RNA通常需要注意3点： ①所有用于制备RNA的玻璃器皿都要经过高温焙烤，塑料用具经过高压灭菌，不能高压灭菌的用具要用0.1％焦碳酸二乙酯(DEPC)处理，再煮沸以除净DEPC。DEPC能使蛋白质乙基化而破坏RNase活性。 ②在破碎细胞的同时加入强变性剂(如胍盐)使RNase失活。 ③在RNA的反应体系内加入RNase的抑制剂。 4. 核酸含量的测定法 紫外分光光度法: l= 260nm; 纯度：A260/A280，对于DNA≧1.8; RNA≧2.0 双螺旋DNA,A=1相当于50 mg/mL RNA或单链DNA,A=1相当于40 mg/mL 寡聚核苷酸