Il-1β对人肤瘢痕成纤维细胞增殖及胶原蛋白代谢的影响.docxVIP

声 声 明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在指导教师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文 不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究 做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的 法律责任由本人承担。 论文作者签名： 蔷螽洁 日期： 卯侈、6、2 关于学位论文使用权的说明 本人完全了解太原理工大学有关保管、使用学位论文的规定，其 中包括：①学校有权保管、并向有关部门送交学位论文的原件与复印 件；②学校可以采用影印、缩印或其它复制手段复制并保存学位论文； ③学校可允许学位论文被查阅或借阅；④学校可以学术交流为目的， 复制赠送和交换学位论文；⑤学校可以公布学位论文的全部或部分内 容(保密学位论文在解密后遵守此规定)。 签 名： 董垂连 日期： 矽心．5、2 导师签名：—遗≥堇L日期：一．逊』二一k 万方数据 太原理工大学硕士研究生学位论文IL一1 太原理工大学硕士研究生学位论文 IL一1 p对人皮肤瘢痕成纤维细胞增殖 及胶原蛋白代谢的影响 摘要 增生性瘢痕是人体皮肤真皮层受到创伤后引起的一系列真皮层增生。 在创伤修复过程中，成纤维细胞起到至关重要的作用，了解和控制成纤维 细胞的生物学行为是促进伤口愈合和预防瘢痕形成的基础和关键。近年来， 随着现代细胞生物学和分子生物学在瘢痕领域的深入研究和迅速发展，对 成纤维细胞、细胞外基质和细胞因子三者之间的相互作用有了进一步的认 识。成纤维细胞可以分泌细胞外基质，而成纤维细胞的大量增殖、细胞外 基质中胶原合成与降解、部分细胞因子的大量产生以及三者之间的密切关 系构成了增生性瘢痕形成的生物学基础。研究发现，在创伤初期，表皮细 胞和真皮细胞将分泌白介素一113(Interleukin-113，IL-113)，且IL一1p具有促进成 纤维细胞、血管内皮细胞增殖和细胞外基质沉积作用。本文实验在细胞水 平，并结合生物学的方法和手段，全面系统地研究了人皮肤成纤维细胞 (human skin fibroblasts，HFB)和瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts， HSF)在离体状态下，不同浓度外源性的IL．113束1J激后，其增殖情况和细胞外 基质中胶原蛋白代谢的改变，有助于进一步了解瘢痕形成的生物学机制以 及为增生性瘢痕的治疗方法及评估提供重要参考。本文的主要工作及结论 如下： (1)采用组织块贴壁法提取并培养HSF，采用胶原酶消化法提取并培养 HFB，HSF与HFB在形态上无明显差异，均呈长梭形；本实验均使用第3～5 万方数据 太原理工大学硕士研究生学位论文代生长状态良好且处于对数增殖期的细胞，以每孔1．5×104个细胞的密度接 太原理工大学硕士研究生学位论文 代生长状态良好且处于对数增殖期的细胞，以每孔1．5×104个细胞的密度接 种于6孔培养板或103个细胞的密度接种于96孔培养板，24 h后，分别用 2．5、5、lO与20 ng／mL浓度的IL．1p培养细胞24 h，以0 ng／mL浓度的IL一1p 培养细胞24 h为对照组；检测细胞增殖以及细胞外基质中胶原蛋白代谢的 相关指标。 (2)采用MTT比色法测定各组细胞的增殖情况，流式细胞分析法测定 各组细胞的细胞周期，并分析各组成纤维细胞S期所占比例。上述两种检 测方法均得出：IL．1B可以促进HFB增殖，抑制HSF增殖，从而抑制瘢痕 的形成；并且随着培养液中IL一1B浓度的升高，其促进HFB的增殖作用越 明显，抑制HSF的增殖也越明显。 (3)采用ELISA法检测各组成纤维细胞上清液中I型胶原蛋白和m型胶 原蛋白的浓度。上述检测方法得出：IL．1p可以促进HFB合成并分泌I、IIJ型 胶原蛋白，抑fliIJHSF合成分泌I、山型胶原蛋白，从而抑制瘢痕发生；并且 随着培养液qhIL一113浓度升高，其促进HFB胶原蛋白代谢的作用越明显，抑 带I]HSF胶原蛋白代谢的作用也越明显。IL—l fl束lJ激能够影响成纤维细胞I、m 型胶原蛋白的合成与分泌，且与IL．1p的浓度有关，期望该结论能为相关疾 病临床用药剂量控制提供理论依据。 关键词：增生性瘢痕，成纤维细胞，IL一1p，增殖，胶原代谢 II 万方数据 太原理工大学硕士研究生学位论文EFFECTS 太原理工大学硕士研究生学位论文 EFFECTS OF IL一1 13 ON PROLIFERATION AND COLLAGEN EXPI之E S SION OF HYPERTROPHIC SCAR FIBROBLASTS AB STRACT Hypertrophic scar is a series of hyperplasia of dermis after deep dermal