荧光光谱析方法及原理.ppt

荧光光谱 参考书 赵南明，周海梦. 生物物理学，高等教育出版社，2000 Emission Spectroscopy, Chapter 11, in K.E. van Holde, W.C. Johnson and P.S. Ho eds. Principles of Physical Biochemistry, Prentice-Hall, 1998 荧光光谱的特点 荧光光谱灵敏度高的原因 荧光辐射的波长比激发光波长长，测量到的荧光频率与入射光的频率不同； 荧光在各个方向上都有发射，因此可以在与入射光成直角的方向上检测； 这样，荧光不受来自激发光的本底的干扰，灵敏度大大高于紫外-可见吸收光谱，测量用的样品量很少，且测量方法简便。 基本原理 Fluorescence Fluorescence is emission from a singlet state, where the electron spins in the molecule are paired. Fluorescence excitation by absorption of energy loses energy as heat by internal conversion the molecule hesitates at the lowest vibrational level of