巴西橡胶树1个Mlo基因克隆及其序列特征分析.PDFVIP

中国农学通报 2013,29(31):21-26 Chinese Agricultural Science Bulletin 巴西橡胶树1 个Mlo 基因克隆及其序列特征分析 1 2 3 3 2 2 覃 碧 ，王 萌 ，薛 松 ，胡中昀 ，郑服丛 ，张 宇 1 （中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室，海南儋州571737； 2 3 海南大学环境与植物保护学院，海口570228；海南大学应用科学技术学院，海南儋州571737） 摘 要：Mlo 基因是植物抗病基因的重要成员。巴西橡胶树Mlo 的克隆将为进一步通过转基因技术培育 抗病橡胶树新品种奠定基础。本研究以大麦Mlo 蛋白序列为探针对橡胶树EST 和转录组数据库进行同 源搜索，并对同源EST 序列进行拼接，得到橡胶树Mlo 的cDNA 序列。进一步通过RT-PCR 扩增，成功克 隆了橡胶树Mlo 基因，其编码区(CDS) 为1668 bp ，编码555 个氨基酸，分子量为63.14 kDa ，等电点是 8.85。对所克隆的橡胶树Mlo 编码蛋白结构进行分析发现，该蛋白具有Mlo 保守结构域，包含8 次跨膜 结构。聚类分析发现，橡胶树Mlo 蛋白与木薯Mlo 同源性最高，达到92.1% ，其次是蓖麻(87.6%) ；在拟南 芥基因组中，与AtMlo8 的相似性最高，达到67% ，因此，将橡胶树中克隆的Mlo 基因命名为HbMlo8。通 过对HbMlo8 基因分析可知，该基因属于Mlo 家族成员，基因的克隆及其序列分析为进一步验证 HbMlo8 在橡胶树中的生物学功能奠定基础。 关键词：巴西橡胶树；HbMlo8；克隆；序列分析 中图分类号：Q781 文献标志码：A 论文编号：2013-1414 Cloning and Sequence Characterization of A Mlo Gene in Hevea brasiliensis Mull. Arg. 1 2 3 3 2 2 Qin Bi , Wang Meng , Xue Song , Hu Zhongyun , Zheng Fucong , Zhang Yu 1 ( KeyLaboratoryofBiologyandGeneticResourcesofRubberTree,MinistryofAgriculture/ RubberResearchInstitute, ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences,Danzhou Hainan 571737; 2EnvironmentandPlantProtectionCollege,HainanUniversity, Haikou 570228; 3CollegeofAppliedScienceandTechnologyofHainanUniversity, Danzhou Hainan 571737) Abstract: Mlo is an important member of plant diseases resistance genes. Cloning and sequence analysis of Mlo gene in Hevea brasiliensis will