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  • 2018-12-25 发布于福建
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05实验五dna限制性酶切和特琼脂糖凝胶电.ppt

05实验五dna限制性酶切和特琼脂糖凝胶电

实验五 DNA限制性酶切和 琼脂糖凝胶电泳 限制性内切酶 EcoR I Restriction Enzyme 识别序列: ------G↓AATT C ------ ------ C TTAA↓G ------ Hind III Restriction Enzyme 识别序列: ------ A↓AGCT T ------ ------ T TCGA↓A ------ 每一种限制性内切酶都有特定的反应条件 pH范围:7.5~8.0 缓冲液组份: Tris(三羟甲基氨基甲烷) NaCl、MgCl2、 巯基乙醇 温度:37℃ 琼脂糖凝胶电泳 电 泳 在电场的作用下,在某种支持介质上,将一个混合物分离成若干条区带的过程。 琼脂糖凝胶的浓度与DNA分离范围 试 剂 TBE电泳缓冲液 45mmol/L Tris-硼酸,1mmol/L EDTA,pH 8.0 加样缓冲液 0.25%溴酚蓝(深蓝色,300bp) 0.25% xylene cyanlo FF (天蓝色,2000bp) 40%蔗糖 EB(溴化乙锭)染色液

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