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几种重金属离子对中华绒螯蟹N_乙酰_D_氨基葡萄糖苷酶活力的影响 　　第 32卷 第 6期 水 生 生 物 学 报 　　V o l 132, N o 162008年 11月 　　ACTA HYDROB I OL OGI CA SI N I CA 　　N ov 1, 2008 　　收稿日期 :2007-08-24; 修订日期 :2008-05-12 　　基金项目 :福建省自然科学基金项目 (B0710001); 2006年福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划资助 　　通讯作者 :黄小红 (1966) ), 女 , 汉族 , 福建建瓯人 ; 教授 , 博士 ; 主要从事动物生物化学方面的研究。 E-m ai:l xhhu ang @v i p . s i na . co m 　　DO I 号 :1013724/SP1J 1000012008160850 　　几种重金属离子对中华绒螯蟹 N -乙酰 -B -D -氨基葡萄糖苷酶活力的影响 　　黄小红 陈宏惠 刘建昌 金艳冬 肖其韬 　　(福建农林大学动物科学学院动物保健研究所 , 福州 350002) 　　摘要 :本文研究 了 Cu 2+、 P b 2+、 Zn 2+和 A g +等重金属离 子对中华 绒螯蟹 (E riocheir sinensis ) N-乙酰 -B -D-氨 基葡萄糖 苷 酶 (NAG ase) 活力 的影响。其 结果表明 :Cu 2+、 Pb 2+和 Z n 2+对 酶活力有 不同程度的 抑制作用 , Cu 2+和 Zn 2+对酶 的抑制作用均表现为非竞争性抑制类 型 , Cu 2+和 Zn 2+对酶的抑 制常数 (K I ) 分别为 1125mm ol/L和 8110mmo /L;Pb 2+对酶 的抑制作用 表现为混 合型抑制类 型 , 其对酶的抑 制常 数 K I 与 K I S 分别 为 10144mm o l/L和 2118mmo l/L。 A g +对酶 的 效 应 为 先 激 活 后 抑 制 , 其 抑 制 作 用 表 现 为 反 竞 争 性 抑 制 , A g +对 结 合 酶 (ES ) 的 抑 制 常 数 K I S 为 204151mm o l/L。 　　关键词 :中华绒螯蟹 ; N-乙酰 -B -D-氨基葡萄糖苷酶 ; 酶活力 ; 重金属离子 ; 作用机理 　　中图分类号 :Q 176; X 5031225 文献标识码 :A 文章编号 :1000-3207(2008) 06-0850-06 　　中华绒螯蟹 (E riocheir sinensis ) 属甲壳纲 , 十足 　　目 , 方蟹科 , 绒螯 蟹属 , 自古 以来是 我国 特有 的名 优水产品 , 其肉味 鲜美、 营养价值高、 风味独特 , 享 誉海内外 , 是我国 出口 创汇的 重要 水产 品。 但近 几年 , 我国工农业发展 迅速 , 大量工农业 污水排入 水体环境中 , 特别是含 重金属的污染物的排入 , 严 重危害了中华 绒螯蟹 的生长 发育和 生存 , 影 响了 中华绒螯蟹养殖业的健康可持续 发展。有学者研 究了汞 (H g 2+ 　　) 、 铅 (Pb 　　2+ 　　) 和镉 (Cd 　　2+ 　　) 等重金属离 　　子可以在中华绒螯蟹体内不同程度地富 集并引起 的蟹体内相关指标 (生长、 酶、 超微结构、 MT 、 遗传 毒性 ) 的变化 , 并探讨了中 华绒螯蟹的重金属中毒 机制 　　[1, 2] 　　。但是国 内外还 未见 从分子 酶学的 角度 　　研究这些重金属离子与中华绒螯蟹 N-乙酰 -B -D-氨 基葡萄糖苷酶 (NAGase , E 相互作用的 分子机理的报道。 　　属甲壳动物的中华绒螯蟹 , 其生长、 形态变化、 生殖器官的发育和断肢再生等 , 都要通过蜕皮和蜕 壳来完成 　　[3] 　　。 N-乙酰 -B -D -氨基葡萄 糖苷酶与其他 　　几丁质酶系的成员共同参与了甲壳类动物蜕壳过程 中的几丁质分解 , 在协助甲壳类动物顺利完成生理 周期性蜕壳的过程中 起了重要作用 　　[4] 　　。本文以中 　　华绒螯蟹内脏 分离纯化得到的 NAGase 为材料 　　[5] 　　, 　　以 CuSO 4、 Pb(NO 3) 2、 ZnC l 2和 AgNO 3等重金属盐溶 液为效应物 , 研究它们对酶活力的影响 , 探讨酶活力 变化与这些效应物之间的相关性以及它们互作的分 子机理 , 为人工养殖中华绒螯蟹食品安全性的监控 提供科学理论依据。 　　1 材料与方法 　　111 材料 中华绒螯蟹购自福州某养殖场。研究 所用的主要试剂 NAGase 由本实验室从中华绒螯蟹 内脏分离纯化得到 , 酶制剂为 PAGE 单一纯 , 比活力