蛋白鉴站定分析.pptVIP

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  • 2018-12-24 发布于福建
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蛋白鉴站定分析

蛋白鉴定分析 2.3质谱法 2.3.1原理: 质谱仪是利用电磁学的原理,使带电的样品离子按质荷比进行分离的装置。离子电离后经过加速进入磁场中。其动能与加速电压及电荷Z有关。 Z:电荷数 ZeU=mv2/2 e:电荷(e = 1.60x10-19C) U:加速电压 m:离子的质量 v:离子被加速后的运动速度 具有速度v的带电离子进入质谱仪的电磁场中,根据所选择的分离方式,最终实现各种离子按m/z进行分离。 根据质量分析器的工作原理,可将质谱仪分为动态和静态仪器两大类,静态仪器采用稳定的电磁场,按空间位置来区别m/z不同的离子。动态仪器采用变化的电磁场,按时间不同来区分m/z不同 的离子。 分离生物大分子多采用电喷质谱法,属于动态质谱仪。基本原理是生物大分子在很高的电场下电离。样品溶液以很低的流速,在高的電場下使生物分子从毛細管中流出來。 2.3.2方法: 样品溶液以很低的流速(1-20μl/分钟)从毛细管中流出来。在毛细管的柱头上施加一个高电压(1-5kv),是柱头液体雾化成很细的带电液滴,这种带电液滴在逆向干燥气流中挥发,使液滴表面电荷密度增大。直到产生的库仑斥与液滴表面张力的雷利极限值相等时,液滴就会发生爆裂,形成更小的子液滴,这些子液滴又被蒸发,又会形成爆裂。如此循环下去,直到液滴变得非常小,它的表面的电荷密度变得非常大,形成很强的电场

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