动物细胞培养大全.doc

PAGE PAGE 33 动物细胞培养大全 /bbs/ 细胞培养基本条件4 细胞培养基种类与基本成分4 液体培养基保存： 5 血清 5 细胞培养环境 6 1、实验室设计 6 2、常用设施及设备 6 3、培养器皿 6 4、细胞培养温度 6 5、合适的气体环境 7 细胞培养无菌操作基本技术 7 工作环境的处理 7 细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒 7 消毒8 常用物品消毒压力及时间： 9 细胞培养的污染及控制 9 （1）污染的类型 9 一、细菌污染 9 二、真菌污染 9 三、支原体污染 9 四、病毒污染 9 （2） 污染来源及鉴别 10 一、污染来源 10 二、污染的鉴别 10 （3）污染的清除和预防 11 一、污染的清除 11 二、污染的预防 12 培养细胞的冷冻保存与复苏 12 ● 概述12 ●…...冷冻保存与复苏原理13 ◆　冷冻速率13 ◆　冷冻保存温度14 ◆　复苏速率14 ◆　冷冻保护剂 14 ●…..冷冻保存方法15 ◆　非玻璃化冻存方法 15 主要材料15 操作过程 15 冻存结果 15 讨论 15 ◆　玻璃化冻存方法 16 主要材料 16 冻存过程 16 冻存结果 16 讨论16 ●…..冻存细胞的复苏16 ◆　非玻璃化复苏的复苏方法 16 主要材料16 复苏过程16 结果17 讨论17 ◆　玻璃化复苏的复苏方法　17 主要材料　17 操作过程　17 结果　17 讨论　17 细胞培养常见问题及解答　17 如何选用特殊细胞系培养基？17 Ｌ-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？17 GlutaMAX-I是什么？培养细胞如何利用GlutaMAX-I？这个二肽有多稳定？17 什么培养基中可以省去加酚红？18 如何用台盼兰计数活细胞？18 如何消除组织培养的污染？18 Tech tips　20 细胞培养从头学　21 常用设备　21 无菌操作　21 玻璃器械洗消　22 新的玻璃器皿的洗消　22 旧的玻璃器皿的洗消　22 细胞培养用液的配制与消毒　23 一、水的制备　23 二、PBS的制备与消毒（也可用于其它BSS,如Hanks，D-Hanks液的配制）…...23 三、胰蛋白酶溶液的配制与消毒：23 四、青/链霉素溶液的配制与消毒　23 五、RPMI1640的制备与消毒：23 六、血清的灭活：24 七、HEPES溶液：24 八、谷氨酰胺：24 九、肝素溶液的配制：24 十、Ｉ型胶原酶　24 十一、明胶溶液：24 注意事项：24 细胞传代培养（消化法）　25 一、传代前准备：25 二、胰蛋白酶消化： 25 三、吹打分散细胞： 25 四、分装稀释细胞： 25 五、.继续培养： 25 传代细胞培养注意事项： 25 细胞的复苏 26 细胞计数 26 细胞的冻存 27 细胞培养技术中的关键因素 28 上皮细胞培养 28 1）表皮细胞培养 28 2）乳腺组织培养 28 3）胃上皮细胞培养 29 4）肝细胞培养 29 5）内皮细胞培养 29 6）毛细血管内皮细胞培养 30 神经组织细胞培养 30 结缔组织类细胞培养 31 1）成纤维细胞培养 31 2）巨噬细胞培养 31 肌组织细胞培养 31 1）骨骼肌细胞培养 31 2）肌细胞培养 31 细胞凋亡的几种检测方法 31 一、形态学观察方法 31 二、DNA凝胶电泳 32 三、酶联免疫吸附法（ELISA)核小体测定 32 四、流式细胞仪定量分析 32 检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法 33 培养细胞染色体显示法 33 1）传代培养细胞染色体显示法 33 2）人末梢血微量全血培养染色体显示法 33 3）羊水细胞培养 34 特殊培养法 34 1）二倍体细胞培养法 34 2）支持物培养法 34 3）细胞分离（克隆）培养 34 4）球体细胞培养 35 5）微载体细胞培养法 35 6）悬浮培养法 36 实验室常用细胞目录 37 细胞目录大全 39 人类组织正常及永生化细胞 39 人类