基因工程的基本操作程序 (上课用).ppt

复习:基因工程的基本操作步骤 提取目的基因, 目的基因与运载体结合, 将目的基因导入受体细胞, 目的基因的表达和检测 看课本P8的图 一、目的基因的获取 1、目的基因:主要指的是编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子 2、获取方法: (1)人工合成 (2)从基因文库中获取目的基因 (3) 利用PCR技术扩增目的基因 从基因文库中获取目的基因 ①、什么叫基因文库? 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库 基因文库的构建模式图 ③利用PCR技术扩增目的基因 PCR:聚合酶链式反应:是以DNA变性、复制的某些特性为原理设计的 前提条件是必须对目的基因有一定的了解,需要设计引物。 启动子:位于基因的首端的一段特殊的DNA片断,它是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得蛋白质 终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断,能终止mRNA的转录 总结:表达载体需由哪几部分组成 复制原点 启动子 目的基因 终止子 标记基因 三、目的基因导入受体细胞 1、导入植物细胞常用的方法是什么?具 体过程是怎样的? 2、导入动物细胞常用的方法是什么?基本操作程序是怎样的? 3、导入大肠杆菌的方法是怎样的?钙离子有什么作用? 1、导入

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