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第10章 动物染色体工程 染色体工程(chromosome engineering)是按照人们的需要对生物的染色体进行操作, 添加、削弱或替代染色体，从而达到定向育种或创造人工新物种的目的。 骡 子 母马和公驴的后代 为什么骡子不能繁殖后代？ 马的染色体数是64条，驴的染色体数是62条，马的卵子染色体数是32条，驴的精子染色体数是31条，通过精卵结合发育成的新个体——骡子的染色体数是63条。 骡子的染色体联绘紊乱因此骡子的生殖细胞不能分化发育成完整的个体。 生育的概率极低 骡子性成熟以后，再形成精子或卵子时，每条染色体都没有相对应的同源染色体进行配对，这样每一条染色体分到哪个配子里是随机的，在这些配子中，只有配子里的染色体完全来自于马的，或来自于驴的，这样的配子才有生育能力。 狮虎兽（liger） 雄狮和雌虎交配产生的后代。狮虎兽的体型比狮或虎都要大，又同时具备两者之间的外貌特征；狮子与老虎相恋、怀孕的概率极低，即使在人工饲养的环境下，虎、狮受孕的机会也仅为1％至2％。幼兽由于先天不足等原因，成活率仅为五十万分之一左右。据资料显示，目前世界上存活的狮虎兽只有20只左右。 狮虎兽（liger） 动物染色体工程 染色体倍性改造 结构改造 人工染色体的利用 10.1.1 动物的多倍体育种 多倍体（polyploidy）:是指体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体 多倍体产生机制：通过卵细胞第二极体的保留或受精卵早期有丝分裂的抑制而实现 10.1 动物染色体倍性改造 定义：染色体倍性改造工程是指有目的、有计划地增加或减少一组或几组同源或异源染色体，以创造动植物新品种的一项染色体工程技术。 主要包括多倍体育种和单倍体育种。 10.1.1 动物的多倍体育种 　b.秋水仙碱：可以抑制细胞分裂中纺缍丝的形成，因而抑制有丝分裂。 　其它药物：N2O 、CHCIF2和聚乙二醇等。 　缺点：化学药品一般比较昂贵、且具有毒性，影响处理后的胚胎发育，同时加上化学药物诱导产生的多倍体往往是在育种上没有价值的镶嵌体，所以化学方法在实际中的应用不及物理方法。 2) 生物学方法 生物学上主要通过杂交尤其是种间杂交获得异源多倍体。 Rasch等（1965）年首次证明了三倍体脊椎动物可以通过杂交产生，他们将雌核发育的二倍体帆鱂（Poecilia formosa）与P.Vittate杂交，得到三倍体后裔。 例如用雌性草鱼（2n＝48）与雄性三角鲂（2n＝48）杂交可以获得子一代染色体数目为72的草鲂杂种三倍体。 异育银鲫与兴国红鲤杂交获得的复合四倍体，通过细胞方法证明其产生的原因是受精卵发生了两性融合。 这种不同科、属、种之间的远源杂交，会导致第二极体不排出，而产生多倍体。 3). 物理学方法 　　包括温度激变（温度休克法）、机械创伤、电离辐射、离心、水静压法和高盐高碱法等。 ⑴ 温度休克法：冷休克法（0～5℃）和热休克法（30℃）。 　定义：用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导三倍体或四倍体的方法。 　关键：能否成功地阻止第二次成熟分裂或第二极体的排出。要达到这一点，必须考虑温度处理的开始时间（TA）、处理持续时间（D）和处理温度（T）这三个因素。 ⑵ 水静压法：采用较高的水静压（65kg/cm2）抑制第二极体的放出或第一次卵裂来产生多倍体。 　优点：诱导率高（一般在90％～100％）、处理时间短（3～5min），对受精卵损伤小、成活率高。 　缺点：需要专门的设备——水压机，成本较高，其样品室容量有限，处理卵的量有限，所以不适于大规模生产的。 2．多倍体的倍性鉴定 （1）直接法 1）染色体计数：是鉴定多倍体的一个准确的直接方法，但比较费时。 2）DNA含量测定：细胞DNA含量测定是倍性鉴定的另一个有效的直接方法。 （2）间接法 1）体积测量 2）蛋白质电泳 3）生化分析 核体积测量：二倍体/三倍体核体积之比为1:1.5，二倍体与四倍体的核体积之比为1:1.74。核体积测量法省时、简单，在生产现场就能进行而广为人们采用，但缺乏准确性，亦测不出嵌合体，往往需要校正； 生化分析：如在关东系银鲫中，三倍体红血球的丙酮酸激酶的含量含著高于二倍体。 染色体计数：是鉴定多倍性倍性的一种最为准确、直接方法，但缺点是费时； DNA含量测定：流式细胞仪。是较为先进常用的方法，其测定快速准确，并能测出嵌合体，但需要特殊的仪器设备。 采用何种方法均有利有弊，进行鉴定主要依赖于所测样本的发育时期、实验要求和所具备的仪器设备条件。 多倍体育种技术方法简单、见效快，有潜在的理论和应用价值。 许多诱导的多倍体动物如两栖类、鱼类、贝类等都具有良好的生存力和生长率。 种间杂种生长