高中实验化学课题2纸层析法[1].ppt

课题2 用纸层析法分离铁离子和铜离子 叶绿素含有胡萝卜素、 叶黄素、叶绿素a、 叶绿素 b等色素，那 么如何分离、提纯叶 绿体中的色素呢？ 一、纸层析法基本原理 亲脂性强的成份在流动相中分配的多一些， 随流动相移动的速度就快一些。 亲水性强的成份在固定相中分配的多一些， 随流动相移动的速度就慢一些。 作 业 《实验化学》作业本—— “纸层析法分离铁离子和铜离子” * 菠菜的叶绿体中色素的提取和分离 纸层析法的应用展示： 纸层析法的原理是什么？ 以滤纸作为惰性支持物，附着在纸上的水是固定相，不与水混溶的有机溶剂作为流动相。 样品溶液点在纸上，作为展开剂的有机溶剂自下而上移动，样品混合物中各组分在水或有机溶剂中的溶解能力各不相同，各组分会在水与有机溶剂两相中发生溶解分配，并随有机溶剂的移动而展开，达到分离的目的。 性质不同的组分分离在滤纸的不同位置上 具有细微缝隙的物质或直径很小的细管(称毛细管)与液体接触时，液体沿细缝或毛细管上升的现象称毛细现象。 毛细现象是物质分子间作用力的结果，常见的纸张或毛巾吸水都是毛细现象。 流动相和固定相的选择 一般来说，能溶于水的待分离物质，选择水做固定相(吸附在滤纸上)，以与水不混溶的有机溶剂做流动相 毛细现象 2、裁纸 3、画原点 6、展开 7、显色 1.5cm×20cm 滤纸不可触及试管的内壁，纸条末端浸入展开剂约0.5cm,不能让试样点浸入展开剂 二、操作方法 1、配制试样溶液 离滤纸末端约2cm处用铅笔 4、点样 用毛细管取样品溶液，轻轻点样于原点上，晾干，重复3～5次。斑点直径需0.5cm 5、取展开剂 不能粘到试管壁上 约2cm 试样点 如果试样接触展开剂，样点里要分离的离子或者色素就会进入展开剂，导致实验失败。 三、纸层析法分离铁离子和铜离子 1、实验原理 含有Cu2＋和Fe3＋的溶液涂在滤纸一端，丙酮作展开剂，在滤纸的毛细作用下，展开剂携带Cu2＋和Fe3＋沿滤纸纤维向上移动的速度不同，一段时间后，Cu2＋和Fe3＋距起点的距离会不同，从而达到分离的目的。 流动相： 丙酮 2、实验操作要点 （1）裁纸 （2）点样 （3）展开 （4）显色 1.5cm×20cm 重复点样3～5次后晾干 离滤纸条一端2 cm处 滤纸不可触及试管的内壁 滤纸条下端浸入展开剂中约0.5cm 为使观察效果更明显， 采用氨熏显色。 （1）层析过程中的实验现象 （2）氨熏后的实验现象 用小烧杯代替大试管。用铁丝横穿过滤纸，架在烧杯上方（如图）。调节完滤纸高度后，盖上培养皿形成气室。 氯化铁层，颜色较深 硫酸铜层，颜色稍浅 3、实验现象 上端出现红棕色， 下方出现蓝色 （1）为防止水解，饱和FeCl3和CuSO4可加少量HCl或H2SO4酸化，不影响实验效果。 4、实验注意事项 （4）滤纸吸水性很强，点样操作要求迅速。 等到滤纸完全干燥以后才能再次点样。 （2）氨熏需在通风实验室内进行。 （3）层析速度开始较快，后逐渐减慢，大约10分钟即可分离完全。 拓展课题1－2 菠菜的叶绿体中色素的提取和分离 操作步骤： 研磨、取液、点样、层析 用圆滤纸改进实验的实验现象 5分钟 15分钟 菠菜 5分钟 20分钟 青菜 拓展课题1－3 用粉笔进行层析分离 实验操作要点及主要实验现象 实验操作要点 （1）配制混合液 （2）点样 （3）层析 色谱分析法： 1、简介：基于混合物各组分在体系中两相的物理、化学性能差异（如吸附、分配差异等）而进行分离和分析的方法。 　国际公认俄国M.C.茨维特为色谱法的创始人。 （1）按流动相和固定相的不同，色谱法分为气相色谱法和液相色谱法。气相色谱法的流动相是气体，液相色谱法的流动相是液体 （2）按吸附剂及其使用形式可分为柱色谱、纸色谱和薄层色谱。 （3）按吸附力可分为吸附色谱、离子交换色谱、分配色谱 （4）按色谱操作终止的方法可分为展开色谱和洗脱色谱。 （5）按进样方法可分为区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。 色谱法的分类： 气相色谱法和液相色谱法 气相色谱仪 液相色谱仪 柱层析法 纸色谱法柱色谱法薄层色谱法 纸层析法作为一种物质分离的简单方法，是色谱分析法的一种。 薄层色谱分离 ，将固定相在玻璃平板上铺成薄层而进行分离的一种分离技术。薄层色谱是柱色谱和纸上色谱两者的结合。 *