微生物的显微镜直接计数法试验目的及要求.PPTVIP

微生物的显微镜直接计数法 一、实验目的及要求 1.了解血球计数板的构造、明确其计数原理。 2. 掌握使用血球计数板显微镜下直接进行微生物计数的方法。 二、实验原理 ??? 显微直接计数法：将小量待测样品悬浮液置于计菌器上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。 ??? 显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如酵母、细菌、霉菌孢子等。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板，一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽（Petrof Hausser）细菌计数板或Hawksley计数板。三种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。而血球计数板较厚，不能使用油镜，计数板下部的细菌不易看清。 ??? 血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间较宽的平台，被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数区。 计数区的刻度有两种： 一种是计数区（大方格）分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格； 另一种是一个计数区分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。 计数区由400个小方格组成。 每个大方格边长为1mm，其面积为lmm2，盖上盖玻片后，盖载玻片间的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3。 使用血球计数板计数时，通常测定五个中方格的微生物数量，求其平均值，再乘以25或16，