快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫胶体金诊断试纸条的研制.pdfVIP

引言 1引言 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine and reproductiverespiratory 新病毒性传染病。其特征为发病母猪厌食、发热、怀孕后期发生流产、死产和木乃伊胎，幼 龄仔猪发生呼吸道症状。目前该病己住全球范嗣内传播、蔓延(An TQ等，2005)。2006年 夏季由PRRSV新变异株引起的高热病在我国南方诸省爆发，给养猪业造成严重损火(童光 志等，2007)。目前PRRS老疫区并未消灭，新疫区又不断发生，对养猪业造成的危害更为严 重。 1．1猪繁殖与呼吸综合征病毒病原学 1．1．1分类地位 PRRSV在生物学、结构特征和遗传性上与马动脉炎病毒(EAV)、小鼠促乳酸脱氢酶病 制、基冈组非常易变异、可引起隐性感染或持续感染等几个重要特性。 1．1．2形态特征 球形，直径为45～65nm，核衣壳直径为30～35nm，外有平滑的脂质双层膜。 1．1．3理化特性 4C 48h或56 1．14～1．159／cm3。PRRSV对热敏感，在37C45min即丧失活性；该病毒对pH 低于5或高于7的环境中很快被灭活。该病毒对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感，在含有低浓度去 污剂的溶液中很不稳定，释放出无感染性的核心粒子。PRRSV无血凝活性。 1．1．4培养特性 等少数几个细胞系中增殖，个别北美分离株仅在PAM或CL2621细胞中生长。病毒感染细胞 后，可引起细胞变圆、成堆、核同缩等细胞病变效应(CPE)。 东北农业人学农学顾f’学他论文 IIIII 1．1．5分子生物学特性 1．1．5．1基因组结构 根据病毒基因组核菅酸序列的不同，可将PRRSV分为两个基冈型，即北美型(VR2332) 和欧洲型(LV)(Chen l NCR)，在两种基因型的毒株中同源性高达99％。 89个核苷酸的非编码IX．(Non．CodingRegion 半胱氨酸和组氨酸的锌指区：(3)蜗牛酶基元序列；(4)功能不明的保守区域。其余的阅读 病毒核农壳蛋白。在ORF7终止密码予之后是3’端非编码区，含有poly(A)结构，其长度 在14~23个核苷酸之间。在poly(A)结构的上游存在～个高度保守的八核苷酸序列。我国 结构。 1．1．5．2病毒蛋白 核农壳(N)蛋白，由ORF7编码，相对分子质蹙约为15ku，为碱性亲水性蛋白质，是 码，相对分子质量约为19ku，为非糖基化跨膜蛋白，M蛋向比N蟹自早现更高的保守性(江 糖基化囊膜(E)蛋自，E蛋白是具有6个潜在位点的基础结构，可能是抗原结合位点(Ostrow 华吉等，2000)。 1．1．6遗传变异 大量的生物学和遗传学证据表明，PRRSV存在不同的毒株或分离株。病毒RNA合成时 容易出现内在性错误，RNA基因组因点突变、删除、添加和取代而具有很高的突变频率。两 个基因型毒株的核苷酸同源性仅为55％-70％。通过序列分析，北美璎毒株间的变异明显人于 欧洲型毒株间的变异。PRRSV在猪体内持续感染过程中，会出现病毒亚种或亚群。国外有研 2 引苦 究表明，同一基因型的PRRSV分离株之间存在明显的序列差异，特别是基因组ORFla的 在编码结构蛋白的基因中，以M蛋白基因最为保守，而编码GP5的基因序列差异最大。安 型毒株的ORF5、ORF7的序列分析与比较后，发现两个基冈型毒株的遗传多样性相似。 1．1．7致病机理 各种组织的巨噬细胞对PRRSV均易感，病毒首先在局部的易感巨噬细胞中复制，然后 迅速向全身淋巴组织和肺扩散，有时也向其他组织扩散。临床疾病的发生与病毒最高滴度出 现的时间和出现的组织有关，如经口、鼻感染后病毒首先在扁桃体和肺中增殖。PRRSV感染 多种组织的巨噬细胞后，造成组织出现显微病变，包括问质性肺炎、脑炎、心肌炎、淋巴结 病变和动脉炎等。