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基因工程的操作程到序new2
获得目的基因的方法 1)从基因文库中获取目的基因 基因表达载体的构建——核心 PCR技术—聚合酶链式反应 原理: 前提: 条件: 5.哪项不是基因表达载体的组成部分( ) A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因 6.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法( ) A.基因枪法 B.显微注射法 C.农杆菌转化法 D.花粉管通道法 1.下表关于基因工程中有关基因操作 的名词及对应的内容,正确的组合是 2、下列属于获取目的基因的方法的是( ) ①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 3.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因在基因工程中的主要作用是 A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B.有利于对目的基因是否导入进行检测 C.增加质粒分子的分子量 D.便于与外源基因连接 4. 有关基因工程的叙述正确的是 A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成是在细胞内完成的 C.质粒都可作为运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 * * * * * * * * * * 基因工程的基本操作程序 DUCK179制作 侍 燕 基因工程的基本操作程序 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 操作过程 目的基因的检测与鉴定 目的基因主要是指______________________ 编码蛋白质的结构基因 目的基因的获取 供体生物细胞 取出DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 即:将需要的基因从供体生物细胞内提取出来 目前被广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因(抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。 1.什么是基因文库? 2.怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因? 2) 2)利用PCR技术扩增目的基因 3)人工合成 种类: 基因组文库: cDNA文库: 含有一种生物的全部基因 含有一种生物的部分基因 根据基因的有关信息:如基因的转录产物mRNA 1.用一定的_________切割 质粒,使其出现一个切 口,露出____________。 2.用_____________切断目 的基因,使其产生_____ ____________。 —— 核心 3.将切下的目的基因片段插入质粒的______处, 再加入适量___________,形成了一个重组 DNA分子(重组质粒) 限制酶 黏性末端 同一种限制酶 的黏性末端 切口 DNA连接酶 相同 (二)基因表达载体的构建 质粒 DNA分子 一个切口 两个黏性末端 两个切口 获得目的基因 DNA 连接酶 重组DNA分子(重组质粒) 同一种 限制酶 目的基因与运载体的结合过程,实际上是不同来源的基因重组的过程。 科学家在培育抗虫棉时,经过了许多复杂的过程和不懈的努力,才获得成功。 起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在棉花体内没有表达。 然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端),导入棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端),导入棉花受精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力。 资 料: 基因表达载体的组成: 目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。 a、目的基因 b、启动子 c、终止子 d、标记基因 (三)将目的基因导入受体细胞 常用的受体细胞: 动植物细胞、大肠杆菌、土壤农杆菌、枯草杆菌等。 将目的基因导入受体细胞的原理: 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 转化—— 目的基因进入_________内,并且在 受体细胞内维持_____和_____的过程 受体细胞 稳定 表达 方法 导入植物细胞 导入动物细胞 导入微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 —— 感受态细胞吸收DNA分子 (三)将目的基因导入受体细胞 (四)目的基因的检测与鉴定 ——检查是否成功 检测— 鉴定— ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 方法—— 方法—— 方法—— DNA分子杂交 DNA分子杂
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