二神经干复动作电位分析目原理.pptVIP

水产动物生理病理学实验 实验一、二、三 神经肌肉标本制备 神经干的复合动作电位分析 一、蛙坐骨神经—腓肠肌标本制备 （一）目的原理： 学习神经肌肉标本的制备方法。 （二） 材料： 蛙、手术器械、探针、培养皿、玻璃针、锌铜弓、棉线、瓷盘、任氏液。 （三） 方法： 1、 蛙洗净，双毁髓。 2、除去腹部以下皮肤，打开腹腔，将内脏向上翻，用 粗剪刀剪去上半侧躯体，沿脊椎正中将下肢标本一 分为二，放入培养皿中，加任氏液润湿。 3、从脊椎开始分离坐骨神经至膝关节处，注意不能使 神经干燥，不牵拉神经，尽量少用金属触碰神经。 4、分离股骨，保留靠近膝关节端股骨1cm。 5、分离腓肠肌，在肌腱处扎棉线后提起线，剪去膝关 节下部其余部分。 （四）标本活性检测： 标本活性测定：将锌铜弓搭在神经干上，观察肌肉是否收缩。 实验结束后清洗器械，晾干；垃圾丢入袋中。 二、神经干的复合动作电位分析 （一）目的原理： 观察蛙坐骨神经干的双向动作电位，测定神经兴奋的传导速度，测定神经兴奋的不应期。 （二）材料： 蛙、手术器械、任氏液、屏蔽盒、RM6240B系统、导线。 （三）方法： 1、?制备蛙坐骨神经干标本，放入任氏液中备用。 2、打开RM6240B系统，连接导线后，将坐骨神经干 搭在银丝电极上。 3、神经干复合动作电位： 点击“实验”→ “肌肉神经” → “神经干动作电位”。 刺激器中选“同步触发” ，点击 “开始刺激”，即出现一个双相动作电位波形。 测量动作电位幅度及时程，将动作电位波形复制到文档中保存。 4、动作电位传导速度测定： 点击“实验”→ “肌肉神经” → “神经干兴奋传导速度测定”。 刺激器中选“同步触发” ，点击 “开始刺激”，即在两个通道中出现两个动作电位波形。 点击“分析” →“传导速度测量” →按提示输入数据，得出结果。 将图形复制到文档中保存。 5、不应期测定： 点击“实验” → “肌肉神经” → “神经干兴奋不应期的自动测定”。 刺激器中选“同步触发” ，点击 “开始刺激”，即开始自动测定。 在双刺激作用下，出现两个动作电位，随着双刺激间隔缩短，第二个动作电位向第一个靠拢，一定时间后幅度逐渐减小。当第二个动作电位幅度开始减小表示已进入相对不应期，完全消失表示进入绝对不应期。 将图形复制到文档中保存。 6、??结果与分析： ?a、 结果打印： 将图形整理 → 建立文件夹 → 设置成共享 → 到1号机“网上邻居”中“邻近的计算机”上找到本组机号 → 找到文件 → 打印。 b、分析。 实验结束后清理并擦干屏蔽盒，收好导线。 实验四、血液学指标的测定 红细胞脆性测定及分析 凝血时间测定 血红蛋白含量测定 一、红细胞脆性测定及分析 （一）目的原理 学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外液渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要性。 将血液滴入不同的低渗溶液中，可检查红细胞膜对于低渗溶液抵抗力的大小。开始出现溶血现象的低渗溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力；出现完全溶血时的低渗溶液浓度，则为该血液红细胞的最大抵抗力。 （二）材料： 各种动物、1%肝素、1%氯化钠溶液、蒸馏水、10?ml小试管、试管架、注射器、5?ml移液管。 （三）方法： 1.溶液配制：取10个小试管，配制出10种不同浓度 的氯化钠低渗溶液（0.25%，0.3%，0.35%，0.4%， 0.45%，0.5%，0.55%，0.6%，0.65%，0.9%）。 2.取血：采用末梢血，肝素抗凝。 3.加血：在各试管中各加一滴抗凝血，轻轻摇匀，静 置1～2?h。 （四）观察结果： 根据各管中液体颜色和浑浊度的不同，判断红细胞脆性： ①未发生溶血的试管：液体下层为大量红细胞沉淀， 上层为无色透明，表明无红细胞破裂。 ②部分红细胞溶血的试管：液体下层为红细胞沉淀， 上层出现透明淡红（淡红棕）色，表明部分红细胞 已经破裂，称为不完全溶血。 ③红细胞全部溶血的试管：液体完全变成透明红色， 管底无红细胞沉淀，表明红细胞完全破裂，称为完 全溶血。  二、凝血时间测定 （一）目的原理： 血液流出血管后，受到刺激的血小板就会释放出一系列凝血因子，使血中的纤维蛋白原转化成网状的纤维蛋白，血液发生凝固。 测定凝血时间可反映血液本身出凝血因子是否缺乏或减少。本实验用鱼作为实验