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局限性： CRISPR/Cas9对目的序列的识别与结合必须有PAM的存在。这就使得该系统对基因组的靶向识别位点被限制在平均每 8 个碱基一个位点。 问题 CRISPR/Cas9 来源于细菌，它是否会对哺乳动物细胞或个体产生毒性或是否会诱发哺乳动物细胞或个体的免疫反应？ CRISPR/Cas系统是依赖ＤＮＡ复制或者转录过程将ＤＮＡ解螺旋还是本身就具有ＤＮＡ解旋能力？ CRISPR/Cas9 系统如何导入受体并保证CRISPR系统的组份能准确地到达 DNA 靶序列？ 如何突破PAM序列的限制、如何建立对Cas9特异性(脱靶效应) 的全面评价体系、如何构建不同物种中可通用的Ca
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