2014高考生物第一地轮复习课件x3-1.pptVIP

第1讲　基因工程——及其安全性(含生 物武器) 一、基因工程的概念及基本工具 1．概念 (1)操作环境：体外 (2)操作水平：分子(DNA)水平，又叫______________ (3)原理：________ (4)优点：定向改造生物性状 2．基因工程的基本工具 (2)DNA连接酶 (3)载体 二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取 (1)目的基因：编码蛋白质的基因。 (2)获取方法：从基因文库中获取、利用_________扩增目的基因、利用___________人工合成。 2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的：使目的基因在受体细胞中____________，并可以遗传给下一代；使目的基因能够_______和发挥作用。 (2)基因表达载体的组成：目的基因、________、终止子和标记基因等，如图。 ①与载体相比较，增加启动子、目的基因和终止子三个基因片段，其功能各不相同。 ②启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA)；终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。 3．将目的基因导入受体细胞 导入植物细胞：________________、基因枪法、花粉管通道法 导入动物细胞：____________ 导入微生物的方法：先用________处理再融合 4．目的基因的检测和鉴定 (1)检测：分子水平。 检测是否有目的基因：分子杂交技术 (________＋转基因生物________) 检测是否转录：分子杂交技术 (DNA探针＋转基因生物________) 检测是否翻译：________________ (2)鉴定：个体水平。 三、基因工程的应用 四、蛋白质工程 1．崛起缘由 天然蛋白质________________人类生产和生活的需要。 2．目标 根据人们对蛋白质功能的特定需求，对____________进行分子设计。 3．操作手段 基因修饰或基因合成。 4．设计流程 预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测应有的________序列→找到对应的____________序列(基因)。 1．基因工程的基本原理和理论基础概括(如下图) 2．与DNA分子相关的酶 (1)几种酶的比较 (2)限制酶与DNA连接酶的关系 ①限制酶不切割自身DNA的原因是：原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 ②DNA连接酶起作用时不需要模板。 3．载体 (1)作用 ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)具备的条件 ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接。 ③具有特殊的标记基因，以便进行筛选。 (3)种类 ①质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，能够自我复制的很小的双链环状DNA分子。 ②λ噬菌体的衍生物。 ③动植物病毒。 (1)一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。(2)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 ★　本部分知识多以选择题的形式出现，并且与必修内容联系密切，也可在基因工程综合题中作为某一具体问题出现。 (2012·江苏单科，32)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ 4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C CGG、G GATCC、GATC、CCC GGG。请回答下列 问题。 (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由______连接。 (2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是______________末端，其产物长度为______________。 (3)若图1中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA片段。 (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是__________________。 解析　本题主要考查基因工程中限制酶的作用原理和重组质粒构建的相关知识。(