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土豆磷酸化酶的分离及直链淀粉的酶合成 中南民族大学 药学院 化学生物学教研室 土豆磷酸化酶的分离及直链淀粉的酶合成 化学生物学实验 6学时 5. 思考题 2. 实验原理 3. 仪器与试剂 4. 实验步骤 1. 实验目的 2.实验目的 6学时 （1） （2） （3） 酶（土豆磷酸化酶）的分离 酶合成（直链淀粉） 酶活性测定 化学生物学实验 化学生物学实验 6学时 2.实验原理 2.1 土豆磷酸化酶的分离原理 （硫酸铵分级沉淀法，盐析法的一种） 化学生物学实验 6学时 1.实验原理 2.2 直链淀粉的合成原理 化学生物学实验 6学时 1.实验原理 2.3 检验磷酸根的原理 （酶活性测定原理） 无机磷酸根与钼盐的硫酸溶液可生成磷钼酸。磷钼酸可氧化metol（4-甲氨基酚硫酸盐），而这一氧化反应会发生从黄到蓝的颜色变化。此时可测定溶液的吸光度变化。氧化反应后溶液中的磷酸根量可通过与校正曲线的对比进行测定。 + 颜色由黄变蓝 3.仪器与试剂（1） 仪器与试剂 化学生物学实验 6学时 2.5Kg土豆、削皮和切土豆用的一把刀、一个粉碎机、一台离心机和离心管（1L）、10g三（羟甲基）氨基甲烷（Tris）、一台可控温搅拌器、一个搅拌子和一个三角瓶（2L）、1Kg硫酸铵、水和一台天平 土豆磷酸化酶分离所需 1.1g葡萄糖-1-磷酸酯二钾盐二水合