医用化学实验.pptVIP

核苷→ （B-R） 磷酸（P） 2、鉴定原理 核酸→核苷酸→ 基碱（B） 戊糖（R） 核酸的基本组成单位 嘌呤（A G） 嘧啶 核糖（C U） 脱氧核糖（C T） a:磷酸+钼酸铵 磷钼酸 钼蓝 b:嘌呤+AgNO3 絮状嘌呤银 c:核糖 糠醛 绿色化合物 d: 脱氧核糖 ω-羟基-γ-酮基戊醛 蓝色化合物 氨基萘酚磺酸 H+ 3，5-二羟基甲苯 H+ 二苯铵 操作步骤 1、提取步骤 制备肝组织匀浆： 脱臼处死或断头处死 剖腹取全部肝组织 生理盐水冲洗血污，吸干净 三氯醋酸2ml 分散匀浆机匀浆 分离提取 于全部匀浆内加入生理盐水2ml，玻棒混匀 静置3min， 3000rpm 3min, 弃上清 沉淀加入10%NaCl 2ml，沸水浴3min,玻棒搅拌 取出冷却，3000rpm 3min 取上清，逐滴95%酒精2管，混匀 静置5min，3000rpm 5min 弃上清，得白色核酸钠 核酸的水解： 短试管内加入5%H2SO4 3.5ml 玻棒搅匀 沸水浴中10min 成分的鉴定 管号 水解液 5%H2SO4 浓氨水 5%AgNO3 测定管 20d — 2~3d 10d 对照管 — 20d 2~3d 10d 沸水浴3~5min，观察结果，静置15min,观察结果 嘌呤的鉴定 医 用 化 学 实 验 生物化学教研室 张丽娜 实验课注意事项： 不迟到，不早退，做好课前预习工作 穿好白大褂 使用煤气时注意安全 试剂用后及时归位 保持严肃认真的实验态度 及时记录实验结果，按时完成实验报告 实验报告格式： 1、实验目的 2、实验原理 3、实验操作 4、实验结果（真实、客观） 5、讨论（实验报告的核心） 6、意见与建议（可选择） 实验一 医化实验基本操作 玻璃仪器的洗涤 吸量管的使用 注意：右手食指按住吸量管口 溶液的混匀 指弹混匀、搅拌混匀、倒转混匀、旋涡混合器混匀等 实验二 电离平衡与缓冲溶液 实验目的 1、掌握同离子效应的原理 2、学习通过韩-哈方程式配制缓冲溶液 3、观察稀释对缓冲溶液pH值的影响 4、学习吸量管及pH计的使用 1、同离子效应 实验原理 HAc H+ + Ac- NaAc Na+ + Ac- 例： 同离子效应使得HAc的电离度降低，溶液的pH升高 酸碱指示剂： 红 橙 黄 红 淡红 黄 无色 绿 蓝 3.1 4.4 8 10 6 7.6 甲基橙 酚酞 溴麝香草酚蓝 pH = pKa + lg [盐] [酸] 韩-哈方程式 也可表示为： （盐的摩尔数） （酸的摩尔数） n盐/V溶液 n酸/V溶液 当酸与盐混合前的浓度相等时： = pKa + lg V盐 V酸 pH = pKa + lg n盐 n酸 pH 2、缓冲溶液 缓冲溶液加水稀释时，盐浓度与酸浓度作相同 比例稀释，因此，缓冲溶液的pH几乎不因稀释 而改变。 缓冲溶液的缓冲能力有一定限度，超过该限度 缓冲溶液的pH也会发生较大改变 实验操作 1、同离子效应 （1） 各1支 + NH3 . H2O 2ml+ 1滴酚酞 1滴NH4Cl 1滴H2O 摇匀 观察结果 1ml=15滴 （2） 各1支 + 醋酸 2ml+ 1滴甲基橙 1滴NaAc 1滴H2O 摇匀 观察结果 2、缓冲溶液 （1） 0.1mol/L KH2PO4 0.1mol/L Na2HPO4 8 ml 2 ml 5 ml 5 ml 2 ml 8 ml 精密pH试纸检测 pH计检测 韩-哈方程式计算 测完pH值后2管保留 用吸量管进行操作 大试管3支 另取2支小试管，以上面试管2里的缓冲液进行实验 2号缓冲液 2 ml 1 ml 蒸