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临床免疫检验质量保证 卫生部临床检验中心 李金明 定 义 质量保证(Quality Assurance,QA) 为一产品或服务满足特定质量要求提供充分可信性所必要的有计划的和系统的措施。 室内质量控制（Internal Quality Control,IQC) 由实验室工作人员，采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度，旨在监测和控制本实验室工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性，以确定测定结果是否可靠、可否发出报告的一项工作。 定 义 室间质量评价 （External Quality Assessment, EQA） 为客观比较一实验室的测定结果与靶值的差异，由外单位机构，采取一定的办法，连续、客观地评价实验室的结果，发现误差并校正结果，使各实验室之间的结果具有可比性。这是对实验室操作和实验方法的回顾性评价，而不是用来决定在实时的测定结果的可接受性。当EQA用来为执业许可或实验室认证的目的而评价实验室操作时，常描述为实验室能力验证（Proficiency testing, PT）。在以前的文献中，EQA常描述室间质量控制。 定 义 批 (Run) 在相同条件下所获得的一组测定。 均值（Mean） 标准差（Standard deviation, SD或s ) 变异系数（Coefficient of variation, CV） 定 义 正态分布(Gaussian distribution) 当一质控物用同一方法在不同的时间重复多次测定，当测定数据足够多时，如以横轴表示测定值，纵轴表示在大量测定中相应测定值的个数，则可得到一个两头低，中间高，中为所有测定值的均值，左右对称的“钟形”曲线，亦即正态分布，又称高斯分布。 定 义 正态分布的基本统计学含义可用均数（）、标准差（s）和概率来说明。 临床实验室常规检验步骤 标本收集：选择测定项目、标本收集和保存。 实验室测定：标本接收、贴标签、样本处理、检测、测定的有效性和临床诊疗价值。 报告和解释：结果发出、结果解释和临床管理。 质量保证、室内质控和室间质评之间的关系 实验室质量管理体系的建立 质量手册 质量体系程序文件 标准操作程序 (相关记录表格) 质量管理的内涵 写你所做的 做你所写的 记录你已做的 分析你已做的 怎样编写SOP？ 分析你已做的 每次实验结果的分析 表象与真象 多次实验结果的综合分析 趋势的内在含义 仪器设备的使用情况分析 维护与校准周期的有效性 临床免疫检验方法 三大“标记”免疫检验技术:荧光标记、放射性核素标记和酶标 其它标记免疫测定技术：发光物标记、金标、元素标记等 免疫沉淀和免疫凝集试验 免疫检验技术的应用 (1)免疫比浊和免疫沉淀:灵敏度低;可用于体内含量较高的Ig、补体、CRP等的测定; (2)标记免疫检验技术:放免酶免灵敏度高;用于含量低的激素、病原体抗原抗体测定等;荧光标记技术有特定的应用;金标则为一种很方便的point of care检验技术。 免疫检验的标本 标本采集、运送和保存 可能影响测定结果的标本因素 标本类型及采集容器 最常用的标本：血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液 。 建议采用真空采血管及蝶形针具，以免直接接触血液。采集容器最好为一次性无菌密闭容器。 标本采集时间及患者准备 激素和治疗药物：可的松峰值在早晨4～6点之间；生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式释放，须在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高。再如治疗药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。 标本采集时间及患者准备 感染性病原体抗原、抗体 肿瘤标志物 特定蛋白 可能影响测定结果的标本因素 内源性干扰因素：类风湿因子、补体、异嗜性抗体、治疗性抗体、自身抗体、溶菌酶、磷脂、药物小分子、总蛋白浓度等 外源性干扰因素：溶血、细菌污染、标本贮存时间过长、凝固不全、反复冻融 类风湿因子(RF)干扰 RF一般为IgM型，亦有IgG和IgA型 RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点 在捕获法IgM型特异抗体的测定中表现最为明显，因为此时固相包被的抗体为抗人μ链抗体，IgM型RF的存在可使其大量结合于固相。 类风湿因子干扰的排除 稀释标本 改变酶标抗体 用变性IgG预先封闭标本中RF 测抗原,可加入还原剂如2-巯基乙醇去除RF 使用特异的鸡抗体IgY