GB/T 13092-1991饲料中霉菌检验方法.pdf

中华人民共和 国国家标准 饲 料 中霉 菌 检 验 方 法 GB13092一91 Methodfordeterminationof Molds infeeds ， 主肠内容与适用范围 本标准规定了饲料中霉菌的检验方法。 本标准适用于饲料中霉菌的检验。 2 原理 根据霉菌生理特性，选择适宜于霉菌生长而不适宜于细菌生长的培养基，采用平皿计数方法，测定 霉菌数。 3 设备及材料 3.1天平:感量1g,最大秤量1000g, 3.2 显微镜:150OX。 3.3 温箱:25一28士1C。 3.4 冰箱:普通冰箱。 3.5高压灭菌器:2.5kg. 3.6 干燥箱:50^-250士ICa 17 水浴锅:45-77士10C。 I8 振荡器:往复式。 3.9 微型混合器:2900r/min, 3.10 电炉。 3.11 酒精灯。 112 接种棒:镍铬丝。 3.13 温度计:100士IC。 114 载玻片。 115 盖玻片。 3.16 乳钵。 117 试管架。 118 玻璃三角瓶:250,500mI。 119 试管:15X150mmo 3.20 平皿:直径9Cm, 3.21吸管:1,10mL, 3.22 玻珠:直径5mm. 国家技术监督局1991一07一16批准 1992一04一01实施 GB13092一91 3.23 广口瓶:100,500ML, 3.24 金属勺、刀等。 3.25 橡皮乳头。 4 培养基和稀释液 4 1 高盐察氏培养基。 4 2 稀释液。 4 3 试验室常用消毒药品。 5 检验程序 霉菌检验程序如下: 6 操作步骤 6.1 采样 采样时必须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采样工具，如灭菌 牛皮纸袋或广口瓶，金属勺和刀，在卫生学调查基础上，采取有代表性的样品，样品采集后应尽快检验， GB13092一91 否则应将样品放在低温干燥处。 根据饲料仓库、饲料垛的大小和类型，分层定点采样，一般可分三层五点或分层随机采样，不同点的 样品，充分混合后，取500g左右送检，小量存贮的饲料可使用金属小勺采取上、中、下各部位的样品混 合。 海运进口饲料采样:每一船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品，每层从五点取样混合，如船仓 盛饲料超过10000t,则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。 6.2 以无菌操作称取样品25g(或25mL)，放入含有225mL灭菌稀释液的玻塞三角瓶中，置振荡器上， 振摇30min，即为1:10的稀释液。 6.3 用灭菌吸管吸取1:10稀释液10mL，注入带玻璃珠的试管中，置微型混合器上混合3min，或注入 试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次，使霉菌抱子分散开。 6.4 取1mL1:10稀释液，注入含有9mL灭菌稀释液试管中，另换一支吸管吹吸5次，此液为1:100稀释 液。 6.5 按上述操作顺序作1。倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸管，根据对样品污染情况 的估计，选择三个合适稀释度，分别在作10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度 作两个平皿，然后将凉至45℃左右的高盐察氏培养基注入平皿中，充分混合，待琼脂授固后，倒置于 25--28士IC温箱中，培养3d后开始观察，应培养观察一周。 6.6 计算方法 通常选择菌落数在30^-100个之间的平皿进行计数，同稀释度的2个平皿的菌落平均数乘以稀释倍 数，即为每克(或每毫升)检样中所含霉菌数。 6.7 报告 每克(或每毫升)饲料中含霉菌数以个/9(个/mL)表示。 GB13092一91 附 录 A 培养墓和稀释液制备 (补充件) 除特殊规定外，本标准所用化学试剂为分析纯或化学纯;生物制剂为细