miR-206抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞Cdc42蛋白的表达和对细胞骨架的影响.doc

miR-206抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞Cdc42蛋白的表达和对细胞骨架的影响 刘 浩，曹友德，叶维霞，孙阳阳 （重庆医科大学基础医学院病理学教研室，分子医学与肿瘤研究中心，重庆 400016） 摘 要 目的 MciroRNAs是一种单链非编码的小RNAs分子，具有重要的生物学作用。研究发现miR-206能抑制MDA-MB-231细胞的侵袭转移能力，其具体机制并不清楚。通过Targetscan和Pictar预测发现Cdc42是miR-206的靶基因。而Cdc42对肿瘤细胞丝状伪足和侵袭性伪足的形成有重要作用，其丝状伪足和侵袭性伪足恰恰与肿瘤的侵袭迁移有关。本文拟研究miR-206对MDA-MB-231乳腺癌细胞Cdc4的影响，观察其对乳腺癌细胞侵袭转移能力的抑制作用，为进一步阐明mciroRNAs的生物学作用提供基础。精简方法 采用LipofectamineTM2000 转染miR-206进入MDA-MB-231细胞，48h后Western blot检测转染后乳腺癌细胞Cdc4、MMP-2和MMP-9蛋白质表达。用免疫荧光显微镜观察细胞丝状伪足的改变，并进一步用侵袭迁移实验法检测转染前后细胞侵袭力和迁移力的变化。结果 Western blot检测Cdc42、MMP-2和MMP-9在转染前后的表达结果，其条带灰度值与阴性对照组相比都有下降（P0.05）；免疫荧光计数每个细胞平均丝状伪足，空白对照组为（14.99±5.53），EGF组为（23.59±3.92），miR-206组为（9.45±3.59），miR-206+EGF组为（11.77±2.85）。与空白对照组和EGF组比较，miR-206组或miR-206+EGF组细胞丝状伪足明显减少（P0.05）。侵袭实验结果显示，小室膜下的细胞数量空白对照组为（311.7±23.54），miR-206组为（65±13.89），两者差异有统计学意义（P0.01）；迁移实验结果显示，小室膜下细胞数量空白对照组为（793±76.34），而miR-206组为（415.3±20.01），数据有效位不一致。两者差异有统计学意义（P0.01）。结论 miR-206能抑制MDA-MB-231细胞Cdc42的表达和细胞丝状伪足的形成，并且能抑制细胞的侵袭迁移能力。 精简 数据有效位不一致。 关键词：乳腺肿瘤；侵袭；转移；miR-206；Cdc42 中图法分类号： 文献标识码：A 作者简介： 通信作者：曹友德，E-mail:cydcyj@163.com 收稿日期： 修回日期： miR-206 Inhibits Cdc42 Protein Expression，Invasion and Migration of MDA-MB-231 Cells LIU Hao, CAO You-de，YE Wei-xia, SUN Yang-yang （Department of Pathology, Molecular Medicine and Cancer Research Center, Chongqing Medical University, Chongqing 400016，China） Abstract： Objective MicroRNAs are single-stranded, non-coding RNAs that have important function in many biological processes. miR-206 was found to suppress invasion and metastasis of MDA-MB-231 cells. However, it is not clear how it works. Cdc42, which has an important role in the formation of filopodia and invadopodia, is the potential target of miR-206 predicted by Targetscan and Pictar. Filopodia and invadopodia are involed in tumor invasion and metastasis. This study was to investigate whether miR-206 could regulate Cdc42 protein expression and the role of miR-206 on the metastasis of